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用于分子诊断的热响应单腔室多糖微反应器
崔雅馨, 窦红静
(上海交通大学材料科学与工程学院;金属基复合材料全国重点实验室,上海 200240)
摘要:基于逆转录定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)的分子诊断依赖于温度变化驱动的酶促反应过程,因此需要体系与热循环条件具有良好的兼容性。本研究采用水包油乳液策略结合原位琼脂糖凝胶化方法,制备了热响应性单室多糖微反应器。研究了油相组成及琼脂糖浓度对微球形成、粒径分布及蛋白包封效率的影响,并确定异辛醇可作为一种有效油相,在实现稳定乳化的同时降低界面泄漏。随后,将逆转录酶和DNA聚合酶共封装于微反应器中构建单腔室酶促反应体系,并通过一步法RT-qPCR评估其生化兼容性。结果表明,包封酶体系的扩增曲线及循环阈值(Ct值)与游离酶对照组相当,未观察到明显的反应抑制或动力学干扰。此外,多重RT-qPCR实验进一步验证了体系在检测特异性方面的完整性。上述结果表明,热响应性琼脂糖微反应器具备结构稳定性与功能惰性,有望成为一种兼容RT-qPCR流程的分子诊断平台。
关键词:热响应微反应器,多糖,微反应器,酶封装,逆转录定量聚合酶链式反应
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Cui, Y., Dou, H. Thermally Responsive Single-Compartment Polysaccharide Microreactors for Molecular Diagnostics. J. Shanghai Jiaotong Univ. (Sci.) (2026). https://doi.org/10.1007/s12204-026-2938-5
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