中国农业科学｜浙江省农业科学院等多单位联合探索基于DNAzyme信号放大的转基因大豆DBN9004快速检测方法

转基因作物凭借其抗病虫害能力强、营养品质可调控及生产效益显著等核心优势，在全球范围内得到迅猛发展。AgbioInvestor统计数据显示，2024年全球转基因作物种植面积达2.098 亿hm²，同比增长1.9%，创历史新高。然而，与其产业化进程相伴而生的安全争议从未停息，特别是转基因成分的潜在健康影响和生态风险持续引发公众关注。为规范市场秩序，我国修订实施的《农业转基因生物标识管理办法》明确要求对转基因产品实施严格标识制度。在此背景下，发展快速、准确的现场检测方法，已成为保障转基因产品合规流通和生物安全监管的关键技术需求。

近期，浙江省农业科学院等多单位联合完成的题为“基于DNAzyme信号放大的转基因大豆DBN9004快速检测方法”的研究在《中国农业科学》2026年第59卷2期正式发表。

该研究以转基因大豆DBN9004及其受体Jack为试验材料。首先通过生物信息学方法筛选转化体特异性序列作为检测靶标，构建重组质粒9004P作为标准检测模板。采用非对称RPA反应体系，通过调控正向和反向引物浓度比例，在高效扩增目标序列的同时，大量生成激活MNAzyme所需的单链DNA（ssDNA）产物。在此基础上，建立双模输出系统（实时荧光监测模式/终点荧光成像模式）。系统优化关键反应参数：包括温度（35—60 ℃）、探针浓度（125—1000 nmol·L^-1）、RPA引物比例（10000﹕10000 nmol·L^-1—10000﹕31.25 nmol·L^-1）等。采用梯度稀释模板（8×10^-1—8×10⁵ copies/μL）评估方法灵敏度。通过10种转基因作物（GTS40-3-2、ZH10-6等）对方法进行特异性验证。最后采集13份田间样本进行实际样品检测，并与qPCR方法进行比较。 

RPA-MNAzyme联用检测系统的原理和流程

结果显示，灵敏度方面，该方法在45 min内可稳定检出8 copies/反应的靶标DNA；方法重复性与再现性较好，相对标准偏差（RSD）分别为4.44%和5.75%；特异性试验显示，仅DBN9004产生显著荧光信号，与其他转基因品系无交叉反应；实际样品检测中，13份田间样本的检测结果与qPCR结果完全一致。

综上，本研究成功建立了RPA-MNAzyme联用的转基因大豆DBN9004快速检测技术。该方法通过非对称RPA与MNAzyme级联放大相结合，实现双重特异性识别与信号放大；开发闭管式检测体系，有效避免气溶胶污染；建立的双模输出系统可同时满足实验室与田间筛查需求。

浙江省农业科学院杨蕾老师和农业农村部科技发展中心陈子言为该文共同通讯作者，符丽锦和陈冠玮为共同第一作者。

该研究获得农业生物育种国家科技重大专项（2022ZD0402006）、浙江省自然科学基金（LMS25C200002）、浙江省自然科学基金重点项目（LZ23D030001）的资助。

全文链接：

《基于DNAzyme信号放大的转基因大豆DBN9004快速检测方法》

文献引用：

符丽锦, 陈冠玮, 肖功, 汪小福, 彭城, 陈笑芸, 徐俊锋, 陈子言, 杨蕾. 基于DNAzyme信号放大的转基因大豆DBN9004快速检测方法[J]. 中国农业科学, 2026, 59(2): 239-249.

FU LiJin, CHEN GuanWei, XIAO Gong, WANG XiaoFu, PENG Cheng, CHEN XiaoYun, XU JunFeng, CHEN ZiYan, YANG Lei. A Rapid Detection Method for Genetically Modified Soybean Dbn9004 Based on Dnazyme Signal Amplification[J]. Scientia Agricultura Sinica, 2026, 59(2): 239-249.