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DOTAP(AbMole,M9810)是一种广泛使用的阳离子脂质体转染载体,能通过静电相互作用与带负电荷的核酸分子(质粒 DNA、siRNA、miRNA 等)相结合,形成稳定且易于被细胞摄取的复合物,有效促进外源核酸进入真核细胞内部并释放,从而实现高效体外基因递送与基因功能操控,是分子生物学与细胞生物学研究中常用的转染工具[1]。DOTAP(CAS No.:132172-61-3)具有转染效率高、细胞毒性低、适用细胞谱广等优势,可在多种贴壁细胞与悬浮细胞中实现稳定转染,为基因过表达、基因沉默、报告基因检测、基因定点编辑等研究提供了工具[2]。
在细胞实验中,DOTAP(AbMole,M9810)能够高效包裹不同长度与类型的核酸,形成粒径均一、结构稳定的脂质复合物,通过内吞途径进入细胞后,可帮助核酸逃离内体并进入胞质或细胞核,显著提升外源基因的表达效率或基因沉默效果 [3]。DOTAP 转染体系操作简便、重复性好,无需特殊仪器即可完成,适用于高通量基因筛选、信号通路研究等多种实验场景[4]。在基因功能研究中,DOTAP 能用于基因转染以构建过表达细胞模型、siRNA干扰细胞模型,用于探究目标基因对细胞增殖、迁移、周期、凋亡及分化的影响,也可用于荧光报告系统检测启动子活性、转录因子结合效率及信号通路激活程度。DOTAP(1,2-Dioleoyl-3-trimethylammonium-propane)也常被用于纳米递送系统的基础研究,用于优化载体结构、提升核酸包载率、探究细胞摄取机制与胞内转运路径。
参考文献及鸣谢
[1] Felgner, P. L.; Gadek, T. R.; Holm, M.; et al. Lipofection: a highly efficient, lipid-mediated DNA-transfection procedure. Proceedings of the National Academy of Sciences 1987, 84 (21), 7413-7417.
[2] Kawaura, C.; Ohki, Y.; Takizawa, T.; et al. Cationic liposomes for gene delivery: a review. Journal of Controlled Release 1998, 53 (1-3), 1-10.
[3] Basha, G.; Ogris, M.; Wagner, E. DOTAP-based cationic liposomes for siRNA delivery. Oligonucleotides 2009, 19 (1), 35-45.
[4] Zhang, Y.; Li, Y.; Wang, X.; et al. DOTAP liposome-mediated gene delivery in primary cells: optimization and mechanism. International Journal of Molecular Sciences 2020, 21 (11), 3968.
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