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FLS1000荧光光谱仪操作指南

已有 572 次阅读 2025-12-10 22:16 |系统分类:科研笔记

FLS1000荧光光谱仪操作指南

一、 仪器启动

首先启动氙灯电源(在后面)再从上往下依次打开冷却电源，待其冷却到-20℃以下，再按下氙灯按钮(不需要氙灯可忽略这步)方可正常测试。

二、 装载样品

液体（浓度不能太高，样品的吸光值一般在0.1以下以避免内滤效应），固体（薄膜，粉末，块状，颗粒等）均可.

保证制样台/载玻片/样品槽干净，以免污染样品.

变温制样：装载药品；如图将连接线接入冷热台；将药品装进冷热台，对角螺丝拧紧；盖上盖子，接上通气管；更换滤波片（测激发谱，滤波片要在发射波长之前；测发射谱，滤波片要在发射波长之后）；抽液氮；装载；调整旋钮使强度最佳。

新变温制样：打开通气阀，破坏真空；依据样品形态（膜/粉末）选择样镜架，注意保护好螺丝；粉末样品选取对应配套器材，做好清洁；首次制样，如图装配好；将样品安装到冷热台，并装好气缸附件；光谱仪更换底座，注意不取出镜头，装配合适滤波片（通常400nm左右），安装变温台调整强度；抽真空，抽气5min后关闭通气阀，关气泵；打开温度控制器；连接控制线；先打开降温；装液氮；降温至第一个温度点。每达到一个温度点保温2-3 min；一个样品测量结束后升温至360K,保温30 min方可更换样品；按照破真空、更换样品、装载气缸、调整强度、抽气、加液氮降温等步骤测试新样品。

量子产率制样：取出仪器内部透镜；如图取出积分球，注意安装白板（如图是测量粉末朝向，测试液体时，样品槽朝另一边）；注意powder/cuvette；盖子的镜片对准光路.

三、测试

注：（1）在切换光源、修改设置或放置样品之前将狭缝关到最小（0.01nm） ,否则会损坏光电倍增管。

（2）测试样品的瞬态性质之前，请用稳态测试对样品的稳态性质进行表征，了解样品的激发光谱和发射光谱及最佳的激发波长和发射波长。

（3）狭缝可调范围为 0.01-18 nm, 调节时请注意不要超过其上限。

激发/发射:用氙灯；选取合适滤波片，测激发，发射波长之前；测发射，激发波长之后；设置合适激发发射波长，调整强度，几十万为最佳；选择合适探测器（0-850；0-1050）；

磷光寿命：打开微秒灯；选择合适光源，设置波长狭缝调节强度，寿命强度不宜超过2000；打开门控，确保只有磷光作用在样品上；寿命1s 起测，光子数3000，无通道数。磷光条件下不测激发（吸收）光谱。

荧光寿命：安装纳秒灯，按步骤打开纳秒灯；将强度界面中纳秒灯型号校准；选择合适探测器，设置对应发射（检测）波长，调整强度；通道一般为1024、光子数为3000。

变温：新变温降温至第一个温度点后，要先将控温调整至升温，高功率升温；旧变温使用软件，初始稳定在300K ,然后先降温至第一个温度点。每达到一个温度点保温2-3 min；一个样品测量结束后升温至360K,保温30 min方可更换样品；按照破真空、更换样品、装载气缸、调整强度、抽气、加液氮降温等步骤测试新样品。

磷光量子产率（4）： 调试参数时注意关闭门控、激发发射波长相同；光谱矫正如图勾选，步长固定为0.5nm 、积分时间0.1s ，打开门控；分别扫描白板、样品发射谱，合并四条谱线；分析选择量子产率；量子产率界面中选散射峰和发射峰分别测量；分别选取样品、白板谱线；对应选取区间。

荧光量子产率（2）：调试参数时注意关闭门控、激发发射波长相同；光谱矫正勾选两样，可从滤波片波长为起点、步长固定为0.5nm 、积分时间0.1s ，打开门控·；分别扫描白板、样品发射谱，合并两条谱线；分析选择量子产率；量子产率界面中不选散射峰和发射峰分别测量；分别选取样品、白板谱线；对应选取区间。

上转换（以980激发为例）：选择对应光源、光路、探测器；如图打开光源；调整光路；测试激发（吸收）要加140倍衰减片；电流调至0.8；设置发射（监测）波长、设置狭缝；寻找最大强度；如图设置控制盒；如图打开仪器；调节适当光源激发频率；以寿命为例，Time range 小于光源激发频率；命名规则为：样品编号-发射波长-decay-ex980