支原体

支原体（Mycoplasma）是一类没有细胞壁的小原核生物，属于柔膜菌门（Mollicutes）。简单说，它是介于细菌和病毒之间的"特殊细菌"——比常见细菌小得多，但比病毒大、能独立存活繁殖，0.1–0.3 μm、能过除菌滤器。形态高度多形（球形、杆状、丝状、分枝状），基因组小，环状双链 DNA，"油煎蛋"菌落，在固体培养基上长成典型的煎蛋状小菌落。

支原体检测方法

14922-2022 《实验动物 微生物、寄生虫学等级及监测》支原体是大鼠小鼠的必检项目。支原体有多种检测方法:

培养法（标准但慢）免疫法/ELISA（便捷但易假阴/假阳）qPCR（灵敏、快速、可定量、闭管防污染）。

支原体qPCR检测试剂盒

翼和生物试剂盒覆盖 5 种鼠源支原体的检测试剂盒、多重 qPCR 鉴别试剂盒 SPF.M/R-RBF-001（FAM/HEX/ROX/CY5 四通道、10 CFU 灵敏度、含内参）。

支原体啮齿动物检测应包含 5 种支原体（肺、关节炎、溶神经、鼠、希尔氏）:

①关节炎支原体( Mycoplasma Arthritidis)、

②肺支原体 (Mycoplasma pulmonis)、

③溶神经支原体 (Mycoplasma neurolyticum)、

④鼠支原体 (Mycoplasma muris)、

⑤希尔氏支原体 (Mycoplasma collis)

qPCR步骤

样本采集  气管/口咽拭子、粪便、组织、 环境拭子、

核酸提取 支原体无细胞壁，裂解纯化得 DNA，

体系配制（闭管） Mix+引物探针+模板+内参，"全程闭管防污染"，

荧光扩增 上机 1.5 小时，实时采荧光，量化时间优势

结果判读 Ct ≤ 35 阳性、>35 阴性；内参有效才可信，"含内参防假阴性"

支持单位：