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鼠痘病毒
鼠痘病毒,又称小鼠脱脚病病毒,属于痘病毒科正痘病毒属。鼠痘病毒(ectromelia virus,ECTV)是一类有囊膜,基因组为线性双股DNA病毒,病毒粒子呈卵圆形或砖形。感染小鼠的 DNA 病毒,感染小鼠足部、尾部肿胀溃烂、坏死脱落(故称“脱脚病”)。
ECTV的自然宿主为小鼠,高致死性:急性爆发时,死亡率高,尤其对封闭群小鼠是场灾难。可干扰免疫、肿瘤、毒理学、生理学实验数据;导致免疫指标紊乱、肿瘤生长异常。
鼠痘病毒的传统检测方法
传统的病毒检测用 ELISA 的方法检测病毒抗体,但是 ELISA 的方法容易出现假阳性,并且对于免疫缺陷小鼠来说无法产生相应的抗体,导致检测出现假阴性。
鼠痘病毒的qPCR检测方法
鼠痘病毒为双链 DNA 病毒,因此不需要反转录,直接提取 DNA 做 qPCR;实验动物设施常规健康监测探针法特异性优于 SYBR Green 染料法。qPCR检测试剂盒灵敏度高、操作方便,适合进行大样本量的快速筛查。
翼和生物开发了针对鼠痘病毒的qPCR检测方案,并且翼和多重荧光qPCR检测方案可以在一个反应中检测多个病原体。例如SPF.M/R-OVH-005试剂盒中FAM、HEX、ROX通道分别检测鼠痘病毒Ect、小鼠脑脊髓炎病毒TMEV、多瘤病毒POLY三种病毒。并且翼和生物提供DNA/RNA的核酸共提取试剂盒,提取过程中加入了内参核酸基因组,用于质控整个提取和检测过程,内参通过CY5通道进行检测。试剂盒的灵敏度高,特异性强,便于操作。并且多重荧光定量qPCR检测试剂盒的成本相对较低,便于开展大样本量的筛查。
一般说来,样本可进行判读的判断标准:NTC 无扩增、无 Ct;
阳性对照有典型 S 扩增曲线,Ct≤32;样本检测结果有典型 S 扩增曲线,Ct≤35,可判断为阳性样本。如果对检测结果有疑问,或者扩增曲线不明显,可进行复检。
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