实验大小鼠肺炎克雷伯菌危害肺炎克雷伯菌（Klebsiella pneumoniae，Kp），是革兰氏阴性菌，条件致病菌，成对或短链状排列，具有肥厚荚膜，通常无鞭毛，无动力，但有菌毛，广泛定植于实验小鼠、大鼠呼吸道、消化道、泌尿生殖道。易爆发、污染动物实验，影响实验结果和数据。

肺炎克雷伯菌可通过腹腔、呼吸道等途径感染小鼠，导致败血症和多器官衰竭。与其他应激源产生协同危害，对实验研究造成干扰。易导致炎症指标异常、体质量下降与行为异常、病理改变混淆实验结果。导致毒理学、免疫学等科研实验无法正常进行。

根据国标GB14922-2022《实验动物微生物、寄生虫学等级及监测》肺炎克雷伯菌是SPF级大小鼠必须排除的病原体。

实验大小鼠肺炎克雷伯菌的qPCR 检测方法

分子生物学检测（qPCR）提升了检测效率和准确性：实验时间≤6小时，灵敏度高，操作步骤简单，适用于大规模筛查。

目前在用的翼和病原菌检测试剂盒能够很好的检测肺炎克雷伯菌在内的多种病原微生物，符合实验室的要求，使用的Biowing®Common Bacteria Primer&Probe能够匹配到目标病原微生物的DNA。

样品采集（qPCR 适用样本）

样本：拭子、肛周拭子、笼具垫料混合样本；肺组织、气管等；

环境监测：笼盒、饮水、饲养设备擦拭物。

qPCR检测过程

核酸提取：商品化细菌基因组 DNA 提取试剂盒（柱提法）、提取内参对照，洗脱体积 50 μL；

qPCR检测：进行样本的qPCR扩增，整个检测过程闭管，防止污染。

质控设置：每批次设置阴性对照、阳性菌 DNA，同时对提取过程进行质控。

方法学性能优势（对比传统细菌分离培养）

灵敏度高；

特异性高，不与其他菌产生交叉反应；

方便快捷：提取 + qPCR 全程 6 h 内出结果；细菌分离鉴定需 几 天；

适用范围广：可检测活菌、死菌、组织、垫料、环境，适合设施日常监测。

应用场景：

1. 引入动物隔离检疫，qPCR 筛查阴性方可入 SPF 饲养区；

2. 环境样本检测：笼具、水、饲料等采样 qPCR 检测；

3. 月度环境 + 动物样本的 qPCR 常态化监测，早发现早解决。

支持单位：