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鼠痘病毒的荧光定量qPCR检测方法

已有 63 次阅读 2026-2-6 09:24 |个人分类:大小鼠病原体检测|系统分类:科普集锦

鼠痘病毒的生物学特点

鼠痘病毒,又称小鼠脱脚病病毒,,属于痘病毒科正痘病毒属。感染小鼠的 DNA 病毒,感染小鼠足部、尾部肿胀溃烂、坏死脱落(故称“脱脚病”)。

鼠痘病毒(ectromelia virus,ECTV)是一类有囊膜,基因组为180~200 kb大小的线性双股DNA病毒,是动物病毒中体积大、结构复杂的DNA病毒,病毒粒子呈卵圆形或砖形。ECTV的自然宿主为小鼠,1930年在英国的实验小鼠种群中分离,随后在墨西哥、日本、美国、中国均有发现。

高致死性:急性爆发时,死亡率高,尤其对封闭群小鼠是场灾难。

隐蔽性:潜伏感染期间小鼠外观健康,常规血清学检测(如早期ELISA)可能呈阴性,却在应激状态下突然爆发,会严重干扰肿瘤、免疫、代谢等领域的研究数据可靠性。一旦污染设施,可能形成周期性爆发。

 

鼠痘病毒的传统检测方法

传统的病毒检测用 ELISA 的方法检测病毒抗体,但是 ELISA 的方法容易出现假阳性,并且对于免疫缺陷小鼠来说无法产生相应的抗体,导致检测出现假阴性。

 

鼠痘病毒荧光定量qPCR检测方法

团体标准T/CALAS 44—2017《实验动物 鼠痘病毒PCR检测方法》标准文件中描述了鼠痘病毒的PCR检测方法。团体标准T/CALAS 89—2020《实验动物 鼠痘病毒环介导等温扩增 (LAMP)检测方法》描述了鼠痘病毒的等温扩增 (LAMP)检测方法,检测的也是核酸DNA。两个标准的出台说明核酸检测方法在小鼠肝炎病毒检测领域的重要应用价值和可行性,也说明了PCR检测方案的可行性。

翼和生物开发了针对鼠痘病毒的qPCR检测方案,并且翼和多重荧光qPCR检测方案可以在一个反应中检测多个病原体。例如SPF.M/R-OVH-005试剂盒中FAM、HEX、ROX通道分别检测鼠痘病毒Ect、小鼠脑脊髓炎病毒TMEV、多瘤病毒POLY三种病毒。翼和生物鼠痘病毒的qPCR检测试剂盒灵敏度高、操作方便,适合进行大样本量的快速筛查。并且翼和生物提供DNA/RNA的核酸共提取试剂盒,提取过程中加入了内参核酸基因组,用于质控整个提取和检测过程,内参通过CY5通道进行检测。试剂盒的灵敏度高,特异性强,便于操作。并且多重荧光定量qPCR检测试剂盒的成本相对较低,便于开展大样本量的筛查。

 



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