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近几年来,PCR技术不断发展,它以准确、快速、便捷等优点广泛应用在科学研究的各个领域。特别是荧光定量PCR技术,高灵敏、快速、特异性高等特点。实验大鼠小鼠在基础生命科学和药物学方面的应用极为广泛,科学的发展和更新的研究目标对实验动物的质量提出了越来越高的要求。国标GB14922—2022中明确规定了大鼠小鼠病原微生物需要排除的项目。这些病原微生物会影响到实验动物的健康或者实验结果。方便快捷的检测方式有助于提高检测的准确性和成功率。PCR技术越来越多的应用于实验动物病原微生物的检测。
SPF级实验动物根据国家标准GBGB 14922—2022中沙门氏菌、支原体、绿脓杆菌、肺炎克雷伯杆菌、嗜肺巴斯德杆菌等都是必检的病原菌。细菌和真菌的检测中,传统的细菌学培养方法需要培养基培养,富集培养、形态特征观察、生理生化反应以及血清学鉴定等过程,操作复杂、耗时费力,对实验人员的技术要求也很高。对于病毒来说,呼肠孤病毒Reo-3、仙台病毒SV、小鼠肝炎病毒MHV、汉坦病毒HANT都是必须要排除的病毒。ELISA是病毒检测的好方法,但是因为抗体产生相对滞后,并且对于免疫缺陷鼠无法产生抗体,所以需要更灵敏的检测方案。目前,越来越多的研究者使用PCR技术检测这些病原菌和病毒。
荧光定量PCR成为用于检测病毒感染的常用的方法。不同的荧光标记物也使得多重检测成为可能,比如一个反应体系内可见检测多重荧光FAM、HEX、ROX 荧光,每种荧光探针标记1-3种病毒,从而可以实现一个孔中多种病毒的检测。
四款联检试剂盒:国标病毒必检八项、国标病毒选检六项、国标病原菌必检八项、国标病原菌选检七项。联检试剂盒中一个荧光通道可以同时检测 2-3 种病原体,但是不进行具体病原的鉴定,也就是说一旦某个荧光通道有信号阳性,那么该荧光对应的这 2-3 种病原体都有可能是阳性。
翼和生物还开发了十款鉴定试剂盒。鉴定试剂盒中一个荧光通道只鉴定一种病原,所以可以通过荧光信号直接判断感染的具体病原体。
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GMT+8, 2026-1-7 15:35
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