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圆二色散仪 (Circular Dichrosim): 秦培武 2013-6-15 11:53; CD 的理论圆二色谱（ CD ）测量分子在溶液中，通过光学的吸收左和右旋圆偏振光的光，是一种提供分子信息的技术。 CD 信号中观察到相同的光谱区的吸收带的特定化合物，如果各自的发色团的化合物或分子的环境是不对称的。蛋白质的 CD 信号主要发生在两个光谱区。远紫外或酰胺的区域（ 170-250 nm ）的贡献占 ...; 个人分类: 评论|6893 次阅读|没有评论

蛋白质荧光实验的实用注意事项: 秦培武 2013-6-15 11:50; 荧光是一个极为敏感的技术，所以它是必须使用非常干净的比色皿，以避免污染与荧光物质的试管和玻璃器皿。去离子蒸馏水，石英比色皿可以使用，应避免使用塑料容器，因为他们可能会滤出荧光添加剂。此外，实验室的清洁剂通常含有强烈的荧光物质。荧光杂质很容易在实验时被识别。在水中，可以观察到的拉曼散射峰。它源于激励 ...; 个人分类: 评论|3792 次阅读|没有评论

蛋白质研究的生物物理化学方法: 热度 2 秦培武 2013-6-15 11:46; 在最新发表的关于核糖体的综述中，彼德摩尔 ---- 这位因为获奖人数限制（最多三人）而遗憾错失诺贝尔奖的重量级科学家 ---- 认为，核糖体在蛋白质合成过程中所有构象的结构解析工作已经接近完成。这个领域的重点将从结构 ...; 个人分类: 评论|8906 次阅读|3 个评论热度 2

生物大分子的结构解析----X射线晶体学和核磁共振光谱学: 秦培武 2013-6-15 11:09; 一个大分子结构的测定赋予人们来了解和影响生物过程的方式是无与伦比的，同时又给不同的研究领域 ---- 从机理研究到药物开发 ---- 带来清晰理念。结构生物学的学科起源于半个世纪以前，带给了了解生物学的初步的动力来源。并且推动了转变观念：生物学的根是分子，必须用分子和物理化学的语言进行理解 ...; 个人分类: 评论|13721 次阅读|没有评论

STED显微镜: 热度 1 秦培武 2013-6-15 10:40; http://www.anes.ucla.edu/sted/sted.html 一个学习STED显微镜很好的网站，同样有光学背景的人也可以follow一个，生物背景人可以学习一些STED的原理和仪器。如果有感兴趣的朋友，我们愿意合作开发， leica的STED要1000万人民币，我们自己做价格顶多是他们的40%。国内有几个单位已经做出了STED，不知道市场有多大，想 ...; 个人分类: 评论|7437 次阅读|2 个评论热度 1

SPIM显微镜: 秦培武 2013-6-15 10:32; 对SPIM感兴趣的朋友，这里有一个很好的网站，里面介绍了一些搭建经验和技巧，如果有光学背景应该可以follow.对生物背景的人，这也是个很好的学习和问题的平台。 http://openspim.org/Table_of_parts; 个人分类: 评论|3702 次阅读|没有评论

波谱学基础: 热度 11 秦培武 2013-6-14 10:47; 最近正组织一些人出版一部单分子生物物理专著，下面是第二章关于波谱学的一节。有感兴趣的朋友欢迎加入我们参与写作。波谱最早指可见光通过棱角时不同波长光的发散，然而现代的波谱学概念早已得到了极大的延伸。波谱学主要研究具有特定波长或频率的电磁波与物质的相互作用，波谱学数据就是吸收或 ...; 个人分类: 评论|14897 次阅读|35 个评论热度 11

电子倍增式CCD: 秦培武 2013-6-14 10:35; 最后简单介绍一下单分子实验中常用的信号采集装置。请读者先行了解 CCD （电荷耦合器件）的工作原理。 EMCCD （ Electron-multiplying Charge-coupled Device ，电子倍增电荷耦合组件）是特别适用于低光强条件下的设备。和普通 CCD 一样，入射光子在每个像素内转化为电子，电子再被依次平移到读取设备上 ...; 个人分类: 评论|5093 次阅读|没有评论

固定细胞的免疫染色: 热度 2 秦培武 2013-6-14 10:33; 固定细胞的免疫染色总体来说，对 (d)STORM 而言，固定细胞的免疫染色法和普通的免疫荧光实验相同。其主要区别有： 1. 如果是使用 TIRF 模式成像，要将细胞置于匹配的载玻片上。 2. 染色结束后，一般不将样品置于封片剂（ mounting medium ）中，而在 PBS 缓冲液中保存。 3. 基于第二点，为避免 ...; 个人分类: 评论|7590 次阅读|5 个评论热度 2

荧光标记的选择和组合: 热度 1 秦培武 2013-6-14 10:32; (d)STORM 和 PALM 的选择，与细胞学实验中选择免疫荧光染色或是遗传学标记的很多考虑是一样的。 (d)STORM 可以用抗体识别内源性的蛋白，但识别的特异性受到抗体质量的影响（例如对于有些蛋白质，并没有特异性高的抗体）。而 PALM 需要对目标蛋白基因进行序列修饰，加入光控蛋白的片段，再转染目标细胞。在目标蛋白 ...; 个人分类: 评论|5149 次阅读|2 个评论热度 1

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