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今天知识分子发表了“独家专访:面对质疑的韩春雨 ”
我注意到其中韩对自己实验的一段阐述:
“谈到所谓“高超的实验技巧”,韩春雨解释道,他在论文中论述过,不同的细胞表达NgAgo蛋白的速度、高峰期不同,而Ago必须一边表达一边与guide (指guide DNA)结合,而不像Cas那样的可以随时结合guide,一旦错过这个窗口期,Ago表达过了没有结合guide,再结合它就没有活性了,因此它的效率将会降下来,这是一个操作的难点,需要花一番力气摸索。”
首先,这里的NgAgo(还是Ago?[文章中混用的])应该叫“酶”,这点很重要;
从载体表达出Ago的mRNA到发挥作用,有许多步骤,主要的有形成成熟的mRNA,翻译成AA序列,然后要正确地折叠,形成二级、三级结构(四级结构),或许还需要乙酰化、磷酸化、糖基化等修饰,才能发挥作用。
其中有很值得关注的是,Ago是嗜热菌(原核)的酶,其形成高级结构和修饰的环境条件与各种真核生物是有很大的不同的,而不同的真核生物细胞的中形成高级结构的环境也不同,或许这极大地限制的Ago酶在不同生物中的应用。
因此,不能重复的问题,不是什么“高超的实验技巧”的问题,而是需要对Ago基因进行改造,使其在真核生物细胞中能正常地发挥作用。
一点猜想,供讨论。
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GMT+8, 2024-10-16 09:12
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