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化合物不知道怎么用?达咩!| MedChemExpress

已有 576 次阅读 2022-10-23 10:47 |系统分类:科研笔记

小 M 特来解锁小分子化合物 (说白了,就是萌 Cece 为大家整理的小分子产品的使用小贴士,让省心走进科研,速速收藏吧)。

Part 1: 产品选择
(1) 同一个靶点,好多产品
选择产品之前,一定要明确实验目的,小分子抑制剂/激活剂大多是依据具体的信号通路或者靶点进行分类的,确定好靶点信号通路之后,才能准确的选择出合适的产品进行实验。当然,同一个靶点会有好多的产品,这个时候该如何抉择:
a. 文献就是 YYDS!文献自有 everything!
(见推文:检索工具总动员总有一款适合你)
b. 文献里居然寥寥无几哇,还好靶点是确定的!这时可以优先选择生物活性高或者在 MCE 官网排名高的 (排名高的产品往往有过客户验证),当然,一千个科研人,一千个实验结果,具体问题具体分析。
(2) 同一个产品,不同的形式
盐形式是活性药物成分 (API) 存在的一种固态形式,与游离态具有相同的活性成分。成盐可改变化合物的理化性质,如溶解度、结晶度、吸湿性和稳定性等,多数 API   常常以盐酸盐、甲磺酸盐、氢溴酸盐、富马酸盐、醋酸盐、钠盐、钙盐、钾盐等形式。既然不改变活性,那它们存在区别到底是什么?
最大区别的就是溶解度了!(还有个区别就是有无现货)

■以热卖产品 Compound C 为例
在 2 个产品都有现货的前提下,就要从溶解度的角度来选择了。从溶解度数据来看,2 个产品在 DMSO 中的溶解度均为 10 mM。HY-13418A Compound C 在水中需要加酸调节 pH 才能增加溶解性,而 HY-13418 Compound C 盐酸盐形式易溶于水。所以在相同活性的情况下,只是细胞实验,那么二者皆可;动物实验,那么优先选择具有水溶性的盐形式啦!




再以 HY-12815A (MCC950 sodium) 与 HY-12815 (MCC950) 为例,两个产品生物功能一样,但 HY-12815 没有现货,所以优先选择 HY-12815A。

Part 2: 产品储存
(1) 一扫通,通往的顺利之路
在拿到产品后,可先瞅瞅产品 COA,COA 上面会明确标明产品的本身形态:固体 or  液体
小 M 接到客户反馈:我没有买那个 10 mM*1 mL 规格的,为什么到手是液体呢?有些产品因为自身熔点低,比如维生素 E (熔点在 2-3 °C),本身就是液体),纯度,储存条件及注意事项。当然,没有纸质说明书也没关系。
 
(见推文:科研助攻:MCE 那些小工具你都会用吗?)
(2) 产品储存,不纠结

大多化合物较稳定,储存条件为:固体粉末:-20°C 3 年,4°C 2 年;溶液:-80°C 半年,-20°C 1 个月 。或者顶多加个条件:Protect from light (避光);Away from moisture (产品易吸潮,需防潮保存);Stored under nitrogen (充氮气保存,产品易被氧化,需要惰性条件保存)当然,也有部分 “不安分” 的产品,标签和说明书都注明。

*该产品在溶液状态不稳定,建议您现配现用,即刻使用(不建议配制储备液长期保存,最好做到现用现配)





Part 3: 产品使用
(1) 开盖前离心
在产品运输过程中,粉末或溶液可能会附着到管壁或管盖上。开封前使用离心机低速离心,可减少产品的损失。
(2)产品配置
细胞实验
购买实验使用的量很少啦!规格较小,且产品本身也很稳定,可直接按照官网推荐的溶剂 (比较常见是 DMSO, ddH2O, 无水乙醇等) 配置成母液,可分装储存。  

小贴士

多数产品在细胞实验使用剂量都在 μM 级别,但是给药前还是得做好功课,有些药物,比如 AICAR,3-MA 它们的给药浓度就是很高哇!0.5-10 mM 是它们的常用剂量。

有些小可爱还会发现:咦,有些溶剂怎么好生奇怪?DMFTHF这是什么?非常规溶剂,莫要一棒子打死,合理利用,一样是你的好帮手。
(见推文:溶剂大比拼——细胞实验篇)
■ 动物实验:
害,说到动物实验,值得纠结的点就更多了:
小白:“小 M, 10% DMSO 会不会把我的鼠毒死啊”;“小 M, 我的药是 0.5% CMC-NA 直接溶的,我能一次把多天的溶好吗?”;“小 M, 我不会算啊!!”;“小 M, 助溶剂这么复杂,我怎么设置对照?” ......  
(见推文:小鼠的吐槽大会)
靓M 忧伤中:“小鼠以体重 25 g 为例,正常小鼠没有严重免疫缺陷的鼠,200 uL 给药体系,DMSO 占比 10%:也就是里面有 20 uL,小鼠可耐受,当然,体弱小鼠另说”;“且不说小鼠多天用同一管药物,发生污染了小鼠心情如何,更重要的是,家人们,你确定这是可以复溶么?”;“剂量计算,何不使用传闻中的溶解度计算器?;“当然设置对照啊!想要实验做的好,对照必然少不了!  
(见推文:对照设计-动物实验篇)" 。

小贴士

配制溶液时若出现难溶情况,可以采用水浴加热 (一般 37 ℃;多肽产品一般控制在 25℃ 左右) 或者超声 (20-40 kHz,注意是清洗超声仪器!探头超声仪器不推荐,不推荐!!) 的方式辅助溶解。





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1 郑永军

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