当实验结果和期盼相反的时候

 

  做实验的人常常会遇到实验结果和自己预期相反的时候，对此处理的方法不同可能得到截然不同的效果。还是让我讲个真实的故事吧。

 

  这件事还得从11年前说起，当时已经55岁的我在1年前被遴选为博士生导师。为了不误人子弟，自己必须首先在学术上“充电”。经吕延杰教授牵线和哈医大科研副校长杨宝峰教授的推荐，2001年8月我飞往加拿大，在加拿大萨斯卡测温大学WANG Rui教授的实验室做了一名访问学者。和Dr.WANG商量后，我选择了心肌钙敏感受体（calcium sensing receptor，CaSR）作为自己的研究对象。CaSR是G蛋白偶联受体C家族的成员。当时，人们对心肌CaSR尚没开展研究，属于研究的“处女地”。当时，WANG教授实验室已从分子生物学上证实大鼠心肌细胞有CaSR的表达，我的任务是通过细胞内钙检测从机能学角度加以证明。我上午进行大鼠心脏离体灌流，酶解分离心肌细胞，下午将心肌细胞标记上Ca²⁺探针，并独立进行细胞内钙荧光显微镜的实时记录，常常工作到后半夜。

 

 

  多胺（包括腐胺、精咪和精胺）是广泛存在于所有真核细胞内的小分子生物胺。精胺（spermine）带4个正电荷，是CaSR的激动剂。有一天，当我把10mM精胺加入浴槽时，电脑显示屏上突然出现一片绿光，宛如一朵朵蘑菇云，像原子弹爆炸一样。当时，我十分紧张，心想我是不是把仪器给搞坏了。定下神来，继续观察，那片蘑菇云慢慢消散，浴槽的心肌细胞纷纷由杆状变成了球形。后来，又连续作了5次，4次出现同样的结果。实验结果提示，高浓度精胺激活CaSR，引起细胞内钙大量释放，导致细胞内钙超载和细胞膜损伤，使细胞内钙溢出，汇聚成团，形成蘑菇云。

 

 

  当时我就想：心肌缺血-再灌注时能不能也出现细胞内的内源性精胺增多，进而导致细胞发生“钙爆炸”。倘若如此，揭示心肌缺血-再灌注损伤机制的“钙爆炸”新学说岂不诞生了。

 

  回国后，我让我的博士研究生赵雅君复制了大鼠离体灌流心脏的心肌缺血-再灌注损伤模型，并检测心肌缺血-再灌注不同时间内的多胺含量。过了一段时间，她向我汇报说：“徐老师，心肌再灌注时精胺不仅不多反而减少，怎么办？实验还往下做不做了？”。我说：“再重复几次看看。”结果，还是这样。我说：“再灌注前给点低剂量精胺（1mM）再看看。”结果显示，有明显的心肌保护作用。

 

 根据这些实验结果，我牵头申报了并中标了1项国家自然科学基金课题《大鼠心肌多胺代谢规律和"双刃剑"作用机制的研究》（2005-2007）（这一项目2011年获得了黑龙江省自然科学二等奖）。在此项研究的基础上，赵雅君博士又相继领衔中标了两项相关国家自然科学基金课题《多胺在缺血预适应心肌保护中的作用及其细胞和分子机制》（2008-2010）、《外源性多胺恢复老龄大鼠心肌缺血预适应保护作用的机制研究》（2012-2014），她本人被晋升为研究员和硕士生导师。

 

 当时如果因结果非己期盼而放弃继续实验的话，哪来后来的多项国家自然科学基金课题的中标和研究生的脱颖而出。

 

 这件事告诉我们，在实验中遇到类似的情况，勿要轻易放弃。如果验证方法没问题，而且结果重复性好，就要相信自己眼睛，珍视“上帝”送给你的宝贵提示，让这“科研的火花”放出更大的光辉。希望年青科研工作者记住这一点，它将让你受益一生。

 

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