一、实验目的：

  1、了解透射电镜、扫描电镜各部件的名称、结构及性能；

  2、了解透射及扫描电镜的基本操作程序；

  3、了解电镜样品制备的配套设备。

  二、实验仪器及用品：

  透射电镜；扫描电镜；小白鼠肝脏超薄切片；酵母菌或乳酸杆菌的负染样品；喷好金膜的叶片及花粉样品

  三、方法步骤：

  （一）透射电镜操作规程：

  1、本仪器的操作者必须熟悉仪器的全部操作规程，通过操作考试后才能正式上机操作。

  2、操作程序

  1）开机准备

  （1）    合上总电源闸刀，开启电子交流稳压器，电压指示应为220V。开启循环水，温度指示应为15-20℃。

  （2）    开启主机真空开关。

  （3）    约20分钟后，待高真空指示灯及照相室指示灯亮。

  2）工作程序

  （1）开启主机电源开关，待荧光屏显示操作数据后再进行下一步。

  （2）逐级加高压致所需电压，每加一级高压，必须等高压表中指示针停止摆动才能加下一级。如指示针移出量程，必须从最低移级加起。

  （4）    根据说明书要求进行合轴操作，使仪器处于最佳操作状态。

  （4）根据说明书的操作要求进行观察、换样和拍照。

  （5）作好实验记录及仪器使用记录。

  3）关机程序

  （1）关灯丝电流。

  （2）关高压。

  （3）关主机电源开关。

  （4）关真空开关。

  （5）    20分钟后，关循环水和电子交流稳压器开关。

  （6）    关闭总电源。

  （二）扫描电镜操作规程：

  1、本仪器的操作者必须熟悉仪器的全部操作规程，通过操作考试后才能正式上机操作。

  2、操作程序

  1）开机准备

  （1）合上总电源闸刀，开启电子交流稳压器，电压指示应为220V。开启冷却循环水装置电源开关。

  （2）开启试样室真空开关（VACUUM POWER），开启试样室准备状态开头（STAND BY）。

  （3）开启控制柜电源开关（POWER）.

  （4）约20分钟后，往试样室液氮冷井中加入液氮。

  2）工作程序

  （1）开启试样室进气阀控制开关（CHAMB VENT），将试样放入试样室后将试样室进气阀控制开关（CHAMB VENT）关闭抽真空。

  （2）开启镜筒真空隔阀。

  （3）加高压（ACCELERATION POTENTIAL）至25KV.

  （4）加灯丝电流（FILAMENT）至7.5-8.

  （5）调节显示器对比度（CONTRAST）、亮度（BRIGHTNESS）至适当位置.

  （6）将图象选区开关拨至全屏（FULL）.

  （7）调节聚焦旋钮（MEDIUM）和(FINE)至图象清晰。

  （8）选择适当的扫描速率（SCAN RATE）观察图象。

  （9）根据说明书的操作要求进行观察和拍照。

  （10）作好实验记录及仪器使用记录。

  3）关机程序

  （1）关灯丝电流（FILAMENT）。

  （2）关高压（ACCELERATION POTENTIAL）。

  （3）反时针调节显示器对比度（CONTRAST）、亮度（BRIGHTNESS）到底.

  （4）关闭镜筒真空隔阀。

  （5）关主机电源开关。

  （6）关真空开关。

  （7）20分钟后，关循环水和电子交流稳压器开关。

  （8）关闭总电源。

  四、观察结果：

  1、小白鼠肝脏超薄切片：一般可见细胞膜、核膜、内质网、线粒体、肌纤维等结构。

  2、酵母菌或乳酸杆菌的负染样品：由于重金属盐在样品周围的堆积而使样品显示负的反差，从而衬托出样品的形态和大小。酵母菌近球型，有时可见出芽生殖；乳酸杆菌为杆状。

  3、叶片在扫描电镜下一般可见上表皮有各种纹饰，下表皮可见气孔器形态

  4、花粉在扫描电镜下一般可见表面的萌发沟和纹饰。

  观察过程中寻找典型部位进行拍照。