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Affinity, avidity and specificity of antibody--《Immunohistochemistry》

已有 13585 次阅读 2009-10-28 22:35 |个人分类:读书笔记|系统分类:科研笔记| 抗体, 亲和力, 亲合力, 特异性

Affinity(亲和力): the strength of binding of one epitope to a monovalent antibody, such as Fab fragment, and is expressed in terms of the association constant, Ka.

亲和力为一个抗原表位与单价抗体结合的能力,用Ka表示(M-1,1/moles per liter),值越大表示亲和力越大,可高达1012M-1。室温时,大部分抗原抗体相互作用可于1h内达到平衡,但在4度时却要更长时间(over night)才能达到平衡。

 

Avidity(亲合力)a measure of the contribution of multivalent interactions to the stability of the antigen-antibody complex.一个抗体分子与整个抗原之间的结合强度。

 

区别联系affinity(亲和力)的抗体也许不适合进行免疫沉淀,但往往可以于免疫组化实验中得到很好的结果,这正是由于其高Avidity(亲合力)。然而与蛋白的affinity(亲和力)交叉反应也可在免疫组化技术中造成许多麻烦。

 

Specificity(特异性)由于抗体识别抗体相对较小的区域,故由于抗原分子之间结构有相关性的话,抗体偶尔识别其它抗原的现象也就不奇怪了。免疫组化不容易验证抗体的特异性,一般要用IPWB来验证。

下面用一表来描述特异性在各种免疫化学反应中的区别:

技术

交叉反应

注意事项

   

免疫染色

普遍

较难识别,因为证实抗原一致性的辅助方法有困难

两个无关抗体的对照很重要

免疫沉淀

偶尔

区别交叉反应和相关性很重要

需设立好的对照

免疫印迹

普遍

容易识别,因为根据抗原分子的大小可鉴定

 

免疫亲和纯化

偶尔

应该避免使用交叉反应抗体

 



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IP: 118.132.54.*   | 璧� 璧� +1 [14]zengfeng   2010-4-8 11:08
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IP: 58.56.128.*   | 璧� 璧� +1 [13]寮犲叏鎴�   2009-12-21 15:16
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IP: 121.8.171.*   | 璧� 璧� +1 [12]寮犲缓   2009-11-24 13:12
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IP: 60.216.201.*   | 璧� 璧� +1 [11]绁佸嘲   2009-11-23 21:20
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IP: 61.157.226.*   | 璧� 璧� +1 [10]yuyangrj   2009-11-23 20:34
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IP: 210.75.20.*   | 璧� 璧� +1 [9]LouisN   2009-11-23 09:25
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IP: 219.229.137.*   | 璧� 璧� +1 [8]鏉庢檽鏁�   2009-11-23 07:47
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IP: 210.26.120.*   | 璧� 璧� +1 [7]涓佷笘璋�   2009-11-22 14:42
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IP: 222.66.117.*   | 璧� 璧� +1 [6]鏂囨枃   2009-11-22 13:51
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IP: 116.227.105.*   | 璧� 璧� +1 [5]鐜嬪彿   2009-11-22 12:48
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IP: 180.98.227.*   | 璧� 璧� +1 [4]jinhanzhen   2009-11-22 12:05
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IP: 123.118.100.*   | 璧� 璧� +1 [3]鏉ㄧ幉   2009-11-21 23:24
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IP: 219.142.187.*   | 璧� 璧� +1 [2]姝﹀し灞�   2009-11-21 22:20
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IP: 219.142.187.*   | 璧� 璧� +1 [1]姝﹀し灞�   2009-11-21 21:48
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