前一段时间在实验室里做蛋白质含量检测实验——凯氏定氮，用的是传统的凯氏定氮仪，最后我和实验室另一同学发现：传统凯氏定氮的误差还是很大的，实验的精确性挺差的。

传统的凯氏定氮是蛋白质经过浓硫酸消化之后，用定氮仪把释放出来的氨气收集到硼酸里，再通过标准盐酸滴定，来计算含氮量。这个过程中，误差最大的是来源于标准盐酸滴定的过程，因为滴定终点的判断是根据指示剂变色来判断的，要滴回到粉红色。而就这个“粉红色”每个人肉眼感受是不一样的。我和实验室同学那天都在做凯氏定氮，后来我们发现我们对“粉红色”的定义大不相同，结果，对一蛋白质含量约10-20%的样品，我们俩测定的误差可以达到20%，20%的误差是相当大的。

后来，我们俩一起做了一个小的验证实验，来验证到底谁对“粉红色”的定义更准确，于是我们就用pH试纸来测那“粉红色”的液体的pH，结果发现：即使用pH范围很窄的试纸，也无法准确知道这溶液的准确一点儿的pH，例如，我们觉得两种溶液的pH试纸显示的颜色差不多，而实际上这两种溶液的pH能够相差0.5-1.0之间，这个误差也太大了点。后来，我们就用pH计来精确测定pH，pH计可以得到很精确的pH。通过pH计我们发现，原来我们俩的滴定终点判断都不算准确，真正的滴定终点差不多刚好是我们俩中间的那个时候。也就是说，我们俩计算的误差刚好是约等于正负10%。

于是，我们得出结论：做传统凯氏定氮实验的滴定的时候，滴定终点最好是用pH计来判断，通过肉眼分辨颜色，无论是溶液指示剂法还是pH试纸法，都是误差相当大的。

而现在很先进的微量自动凯氏定氮仪，里面应该有pH计的准确判断滴定终点的功能，用那定氮仪做实验就要准确多了。所以“工欲善其事，必先利其器”，这“器”的作用还是挺大的，尤其是在科研领域。

通过我以前做过的实验发现，还有很多传统的检测方法误差也很大。例如那些比色法测定物质的含量，稀释不同的倍数测定之后计算出来的结果误差也是很大的，而如果能够用其他的办法代替，就能精确很多。以前做还原糖的测定实验用DNS检测法，误差较大，后来实验室有了高效液相色谱，用高效液相色谱来检测，就精确多了。另外，蛋白质检测也有几种不同的办法，几种不同的办法之间测定的数据结果也是有比较大的误差的。

因此，不要迷信经典实验方法，也不要太迷信自己的实验数据，用另外一种方法检测，说不定实验数据又不相同。只有几种不同办法比较，才能够知道精确性究竟如何。

另外，传统的办法不一定准确还有一个表现：例如，凯氏定氮是通过测定含氮量来计算蛋白质含量，而如果样品中有无机氮，也会被算在内，造成结果不准。三聚氰胺被添加到牛奶里，就是个最好的例子，凯氏定氮是检测不出来三聚氰胺的。

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