非洲猪瘟（African swine fever，ASF）是由非洲猪瘟病毒（African swine fever virus，ASFV）引起的一种急性、出血性疾病，死亡率高达100%，严重危害全球养猪业的健康发展。疫苗免疫是传染病防控最经济、最有效的手段。非洲猪瘟病毒（ASFV）感染耐过猪可抵御同源强毒株的再次感染，提示疫苗预防ASF具有理论可行性。目前除越南外仍无可用的商品化疫苗和抗病毒药物。科学家们进行了大量的疫苗研究，陆续尝试了灭活疫苗、亚单位疫苗、重组载体疫苗等策略，结果均未取得理想效果。传代致弱是ASF疫苗研究的重要技术路径，细胞适应株可用于病毒与宿主相互作用、抗病毒药物筛选、诊断方法的研制和病毒生物学特性研究的理想毒株。

近期，中国农业科学院哈尔滨兽医研究所非洲猪瘟防控创新团队赵东明课题组完成的题为“Cell-adapted African swine fever virus Pig/HLJ/18 is highly attenuated but fails to induce immune protection against a challenge with its parental virus”的研究在Journal of Integrative Agriculture（《农业科学学报（英文）》，JIA）2026年10期发表。

该研究利用本实验室分离到的中国首株ASFV强毒株 Pig/HLJ/18在野猪肾细胞（Boar kidney cells，BK2258）上连续传33次，获得了细胞适应株ASFV HLJ18/BK33株。该适应株在BK2258细胞中形成明显的细胞病变效应（CPE），并能稳定且高效地复制，同时在猪肺泡巨噬细胞（PAM）中保留高效复制能力。全基因组序列分析发现该毒株基因组存在一个6162bp的大片段缺失和多个基因单核苷酸缺失或突变，使其高度减毒，但免疫原性弱，不能有效抵抗亲本强毒株的攻击，HLJ18/BK33株在BK2258细胞中稳定复制并形成典型的CPE，因其高度减毒，大大降低了生物安全风险，可作为非洲猪瘟抗体检测方法，尤其是金标准方法IFA或IPMA的理想抗原。

本研究首先将Pig/HLJ/18株接种BK2258细胞，第8代可见明显CPE，特征为细胞出现聚集、收缩、裂解、最后形成圆形噬斑，继续传代至33代，并将细胞适应株命名为ASFV HLJ18/BK33株。HLJ18/BK33株接种BK2258细胞从48 hpi开始形成典型的CPE，感染Pig/HLJ/18株或HLJ18/BK33株的PBMCs在48 hpi时均出现明显的HAD（图1）。此外，HLJ18/BK33株在BK2258细胞中具有良好的复制能力，同时保留了在PAMs细胞中的高效复制能力（图2）。通过全基因组序列分析发现该毒株基因组存在一个6162bp的大片段缺失和多个基因单核苷酸缺失或突变，导致移码突变。（图3）。

图1 Growth characteristics of the African swine fever virus (ASFV) Pig/HLJ/18 and ASFV HLJ18/BK33 in BK2258 cells

图2 Replication kinetic curves of the ASFV HLJ18/BK33 and Pig/HLJ/18 in BK2258 cells and PAMs

图3 Genomic changes of the African swine fever virus (ASFV) HLJ18/BK33 compared with the ASFV Pig/HLJ/18

随后，将HLJ18/BK33株肌肉注射接种SPF猪以评估其毒力和免疫原性。结果表明HLJ18/BK33株高度减毒且在猪体内的复制水平极低。仅能诱导部分猪产生抗体，且抗体水平较低，显示免疫原性较弱（图4）。

图4 African swine fever virus (ASFV) HLJ18/BK33 is highly attenuated in pigs

最后，将HLJ18/BK33株接种SPF猪并用亲本强毒株Pig/HLJ/18肌肉注射攻毒，以评估其保护效果，同时设置5头不免疫仅攻毒的SPF猪作为对照组。结果表明HLJ18/BK33株对亲本强毒株ASFV Pig/HLJ/18不能提供有效保护（图5）。

图5 African swine fever virus (ASFV) HLJ18/BK33 could not induce efficient protection against the parental Pig/HLJ/18.T

中国农业科学院哈尔滨兽医研究所赵东明研究员和朱远茂研究员为该文章的通讯作者，在读博士王婉和在读硕士尹丽为该文章的第一作者。该研究得到了中国农业科创新工程和院重大科技任务的资助。

Cite the article: Wan Wang, Li Yin, Zhenjiang Zhang, Fan Liu, Xin Zhang, Zhigang Wang, Rui Zhao, Menglong Cao, Ying Zhang, Leilei Ding, Renqiang Liu, Encheng Sun, Xiangpeng Sheng, Weldu Tesfagaber, Fang Li, Xijun He, Zhigao Bu, Yuanmao Zhu, Dongming Zhao. 2026. Cell-adapted African swine fever virus Pig/HLJ/18 is highly attenuated but fails to induce immune protection against a challenge with its parental virus. Journal of Integrative Agriculture, 25(10): 4318-4326.

https://doi.org/10.1016/j.jia.2025.03.017    

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