Leflunomide | 来氟米特

MCE 国际站：Leflunomide

中文名：来氟米特

CAS：75706-12-6

品牌：MedChemExpress (MCE)

存储条件：Powder: -20°C, 3 years; 4°C, 2 years.In solvent: -80°C, 6 months; -20°C, 1 month.

生物活性：Leflunomide 是一种嘧啶合成抑制剂，可抑制二氢乳清酸脱氢酶 (DHODH)，并可作为缓解疾病的抗风湿药。 

体外：来氟米特实际上是一种前体药物，已被证明可以抑制单核细胞和 T 细胞的增殖。 Leflunomide 是多种蛋白酪氨酸激酶的抑制剂，在体外细胞和酶测定中，IC₅₀ 值介于 30 mM 和 100 mM 之间^[1]。Leflunomide 能够抑制抗 CD3 和白细胞介素 2 (IL-2) 刺激的 T 细胞增殖。在体外酪氨酸激酶测定中，来氟米特能够抑制 p59fyn 和 p56lck 活性。 Leflunomide 还抑制抗 CD3 抗体刺激的 Jurkat 细胞中的 Ca²⁺ 动员，但不抑制离子霉素刺激的 Jurkat 细胞。来氟米特还抑制抗 CD3 单克隆抗体刺激的远端事件，即人 T 淋巴细胞上的 IL-2 产生和 IL-2 受体表达。来氟米特还抑制 IL-2^[2] 刺激的 CTLL-4 细胞中的酪氨酸磷酸化。来氟米特是一种免疫调节药物，可通过抑制线粒体酶二氢乳清酸脱氢酶 (DHODH) 发挥其作用，该酶在嘧啶核糖核苷酸尿苷一磷酸 (rUMP) 从头合成中起关键作用。来氟米特通过干扰因 rUMP 生成不足而导致的细胞周期进程并利用涉及 p53^[3] 的机制来防止活化淋巴细胞和自身免疫淋巴细胞的扩增。

激酶试验：DHODase 活性通过 DCIP 比色测定来测量。这是一种耦合测定，其中 DHO 的氧化和随后泛醌的还原在化学计量上相当于 DCIP 的还原。 DCIP 的减少伴随着 610 nm (ε=21500 M/cm) 处吸光度的损失。该测定在环境温度（约 25°C）下在 96 孔微量滴定板中进行。在二甲基亚砜 (DMSO) 中制备 10 mM 来氟米特和 A771726 的储备液，并用反应缓冲液（100 mM Tris 和 0.1% Triton X-100，pH 8.0）稀释，以制备不同浓度的抑制剂工作储备液。对于每个反应，孔中含有 10 nM DHODase、68 μM DCIP、0.16 mg/mL 明胶、指定浓度的泛醌、10 μL 抑制剂工作原液以提供指定的最终浓度，以及反应缓冲液。 5 分钟平衡期后，通过添加 DHO 至规定的最终浓度来启动反应。每次测定的反应混合物总体积为 150 μL，最终 DMSO 浓度≤ 0.01% (v/v)。通过记录 10 分钟内 610 nm 处吸光度的损失（在此期间速度保持线性）来跟踪反应进度。速度报告为每分钟 610 nm 处吸光度的变化，每个报告值是三个重复的平均值。在 DHO 或泛醌浓度变化的实验中，其他底物保持恒定在 200 μM。为了确定来氟米特和 A771726 的抑制剂效力，在 0.01−1.0 μM 的浓度范围内测量了两种化合物的不同浓度对 DHODase 反应初始速度的影响。在这些实验中，DHO 和泛醌浓度分别保持恒定在 200 和 100 μM。

热销产品：DOTA-​NHS-​ester  | ML-323  | Cirtuvivint  | KT-474  | PAC  | Bleomycin A5  | Trofinetide  | Succinic acid  | BAY-888  | Linrodostat

研究领域：Metabolic Enzyme/Protease  |  Anti-infection

作用靶点：Dihydroorotate Dehydrogenase  |  Endogenous Metabolite  |  Bacterial

Trending products：Recombinant Proteins  |  Bioactive Screening Libraries  |  Natural Products  |  Fluorescent Dye  |  PROTAC  |  Isotope-Labeled Compounds  |  Oligonucleotides

参考文献：[1]. Davis JP, et al. The immunosuppressive metabolite of leflunomide is a potent inhibitor of human dihydroorotate dehydrogenase. Biochemistry. 1996 Jan 30;35(4):1270-3.

[2]. Xu X, et al. Inhibition of protein tyrosine phosphorylation in T cells by a novel immunosuppressive agent, leflunomide. J Biol Chem. 1995 May 26;270(21):12398-403.

[3]. Fox RI, et al. Mechanism of action for leflunomide in rheumatoid arthritis. Clin Immunol. 1999 Dec;93(3):198-208.