CHO细胞在生物药品中的广泛应用

根据国家药品监督管理局公示，在国产药品中已经上市的且由CHO细胞生产的主要是涉及重组乙型肝炎疫苗、重组人促红素、重组新型冠状病毒蛋白疫苗等20余种药物的生产。目前，尚未上市的就更多了。

根据美国FDA批准上市的生物药，包括了激素、酶、凝血因子、细胞因子、治疗性抗体等数十种CHO细胞标的药物。

利用重组DNA技术表达生物制品，使多肽和蛋白质可用于治疗。人们对这种表达技术的主要担忧之一，特别是在永生细胞系中，永生特性可能转移到药物的最终使用者身上。因此，可能诱发癌症。世界卫生组织（WHO）发布了指导文件，要求在CHO DNA的整个生产过程中进行监测，通过工艺验证或批次放行检测，证明其降低到安全水平。

用于重组表达的 CHO（Chinese Hamster Ovary）宿主细胞残留很可能给生物制品造成污染。若药物研发过程不进行检测，则 无法评估是否充分去除污染物，则可能导致药物疗效降低、致癌性或引起人体免疫反应。

• 免疫反应：CHO细胞残留物，可能引起人体免疫反应，甚至引发严重的过敏反应。

• 致癌性：据文献估计，残留DNA整合到基因组中并诱发癌症的有一定概率。

• 疗效降低：药品中混入的生物活性物质，可能干扰抗体药物的效力，会降低疗效。

• 中国药典2020版四部：3407 外源性DNA残留量测定法中新增定量PCR法
• 美国药典：1130  NUCLEIC ACID-BASED TECHNIQUES—APPROACHES FOR DETECTING TRACE NUCLEIC ACIDS (RESIDUAL DNA TESTING)

生物制品中宿主CHO细胞残留DNA既是是生产中带来的杂质，还存在一定安全隐患。因此，WHO和各国药物注册监管机构一般只允许生物制品中存在100pg/剂量以下的残留DNA。但有时根据杂质来源和工艺，特殊情况下最高允许10pg/剂量。

人们可以通过两种方式解决生物制药过程中的残留DNA问题：（1）通过过程验证中的清除验证；（2）通过常规测试药物物质来监测残留DNA水平。

无论是否通过常规药物产品测试来确定残留DNA含量，还是通过过程验证来证明CHO残留DNA被清除，都需要量化残留DNA的分析程序。用于确定生物药残留DNA含量的分析程序可以包括杂交、基于DNA结合蛋白的仪器、定量PCR（q-PCR）或其他DNA扩增方法。

期望用于量化生物制药中残留DNA的分析程序的检测限接近每剂10pg。基于杂交、DNA结合蛋白和q-PCR的检测通常是首选技术，因为它们可以满足灵敏度要求。

Biowing® CHO 残留 DNA 检测试剂盒用于定量检测各种生物制品的中间品、半成品和成品中 CHO 宿主细胞残留 DNA。采用一套引物探针在FAM通道定量检测样品中 CHO 残留 DNA，另一套引物探针在HEX通道检测内参DNA。