对冻存挑剔细胞THP-1（免疫类）、胰岛胰腺类（原代，系）上皮类、原代、原代血液类

更挑剔细胞：耐药株，稳转株，国内建系，生产用种子库、各类原代。

后面碰到无解无文献支撑等难点痛点都可以讨论。（细工为国内建系，超量培养，维持培养做些技术储备目的）

讨论上述对细胞冻存调戏细胞平时验证推荐，讨论理由，就是冻存前消化成单个，胰酶敏感重要性，这个我们总结有，巨噬系，原代，免疫系，肝类、原代，胰岛胰腺，上皮，腺类，腺类神经类共存系，淋巴类SV40,hTERT

THP-1,正常细胞系。生长特性：成团成片，堆叠生长。（试剂耗材种子库理念一致，要找到复苏活率稳平，多年长时间验证）

这步解决好了，在用经典冻存（经典一定要自己预实验为准），建议做到理想效率是，不管是那种细胞（活率都在80%以上）

细工方案要点提示：①冻存前胰酶处理（细工胰酶经过胰酶敏感细胞测试，提高活率关键步骤，这部验证成功，还可用到转染前细胞质量提升，大大增加转然后成功率，其他救助办法这里不展开，有需要可来信讨论）。②高质量血清，这部分验证成功，后面种子库试剂，正规库来源细胞救助，试验后死细胞过多，细工是通过免疫细胞，巨噬分化比较了不少厂家。实验涉及到分化影响可发试用比较。③促贴壁：特别是上皮类，这类包括很多难养系大部分是上皮类、腺与神经共存系、免疫类特点都包含得系，特点是容易成球，成球速度比贴壁速度要快，贴壁试剂应用这步是关键(也是细工开发这个产品与其他类似产品不同之处）  我们持续统计这类问题解决目的是建系、规模培养、超量培养，维持培养，种子库细胞质量提升做些技术储备。目前有些小进展，涉及方法太多，这里先不阐述，有兴趣用户可来信讨论。

您建系，我全程陪同，总觉得冻存复苏这个很重要。

以下问题困扰实验并不顺利，配合我司胰酶配套。

成团成片，转染效率不高（悬浮免疫，原代请注明）堆叠式生长（类似类器官），原代首代传代后消化不下来（该问题简单解决是，在培养瓶用前铺曾血清）高级解决来信告知详情，给出参考建议。

为更优质精准服务用户，所用试剂耗材，厂家，货号，操作步骤，预期要求告知。

可用复苏活率不高细胞验证，原代，细胞系都可以，告知细胞名称，生长特性，以前冻存方法，活率多少（是否含血清），目的要求，目前原代PBMC案例活率90%,三年统计数据，案例很稳定。