原代建系（技术储备充足后续做建工程系），目前细工技术储备理论上，无bug方案讨论（该方案来自以下问题特点细胞竖向统计）。

国内各地开始，同步验证每个地区五个团队以上，讨论痛点难点可行后同步实验验证，包括各地区生物药创始人，重点室。

各部位从组织到细胞，成纤维，上皮，腺类

涉及统计资料、

二倍体细胞系培养特点总结（适合,原代成纤维,上皮）

乳腺癌、肝癌、免疫悬浮，淋巴瘤、胰岛胰腺、（上皮）

原代痛点难点：离体处理、单克隆、稳转株、耐药株、冻存复苏优化，最简单验证可通过平时培养中问题验证可行，易行后，技术储备先行，后续应用会得心应手

建系用病毒效价质量标准评价老师给些提携或合作，

细胞产物纯化后蛋白保护老师给些提携或合作，

涉及其他实验痛点难点：维持培养、高滴度蛋白病毒生产、晶体研究、外泌体生产，

关键试剂

常用促贴壁试剂有：常用胶原、明胶、多聚类，粘粘蛋白、Matrigel基质胶、

细工开发促贴壁试剂不同处，毒性几乎没有（救助难养株案例五年统计反馈效果）工业应用超长维持培养。具体问题描述后，细工告知我司产品突出特点，实验验证时间七年，案例比较多。就以下重点做些说明。

解决易成团成片问题，这类问题影响细胞活率，维持培养、转染效率不高，冻存复苏活率低。种子库细胞活性维持、单克隆反复保种（简易单克隆法有需要来信告知实验室名称），结合最近几年热门研究痛点问题统计：PDX、单细胞、类器官、给出相关问题理论与实战案例参考，理想状态是平时培养过程中的问题验证效果最好，先有案例问题解决，后面应用会更稳妥，并可行、易行

易成团成片常见系统计如下：

神经胶质类系（BV2,A172,U87MG、U251、TJ905、HS 683、H4、GOS-3、C6、原代上皮首代

各类难养系及原代上皮类:原代上皮首代、SV40、大T抗原系，293、HUN7、HEPG2、HEP3B

免疫悬浮类：THP-1，RAW264.7,JURKAT,HuT 78、RAMOS(RA.1)、NTCC721.221\IM-9、SU-DHL-4、KMYF、DCS

腺类原代、细胞系（腺癌、结直肠腺、前列腺、内膜腺、肾上腺、胸腺、胰腺）

腺癌

人乳腺癌细胞；

 MCF7、MDA-MB-231、MDA-MB-435S、MDA-MB-453、MCF 7B、MDA-MB-157、SK-BR-3、MDA-MB-468、BT-20、MDA-MB-415、MDA-MB-436、MDA-MB-361、HCC1937

人乳腺导管癌细胞；

ZR-75-1、HCC38、ZR-75-30、T47D [T-47D]、BT-549 [BT549]

人乳腺导管瘤细胞；

UACC812、BT-474、MDA-MB-175Ⅶ、MDA-MB-134Ⅵ

人乳腺上皮细胞；MCF-10A、DU4475

人整合SV40基因的乳腺上皮细胞；HBL-100 [HBL100]

人结直肠腺癌细胞；

 Caco-2、HCT-8 [HRT-18]、HT-29、COLO 205、COLO 320DM [COLO320DM]、HCT 116 [HCT116]、LoVo、SW480 [SW 480；SW-480]、SW620 [SW 620；SW-620]、HCT-15 [HCT15]、LS 174T [LS174T]、COLO 201

人结直肠腺癌瘤株；HCT 116 [HCT116]

人前列腺癌细胞

DU 145 [DU145；DU-145]、LNCaP、Vcap、PC-3、2B4

人前列腺癌细胞：22Rv1、DU 145、 VCaP、PC-3

人前列腺癌高转移细胞株；PC-3M IE8、小鼠前列腺癌细胞；RM-1、人正常前列腺基质永生化细胞WPMY-1、人正常前列腺上皮细胞RWPE-1

人卵巢腺癌细胞；SK-OV-3、OVCAR-3

人乳头状卵巢腺癌细胞；Caov-3

人子宫内膜腺癌细胞；

HEC-1-B [HEC-1B；HEC1B]、KLE、Ishikawa、HEC-1-A

人子宫内膜低分化腺癌细胞；EAG3

人肾上腺皮质癌细胞；

SW-13

人十二脂肠腺癌；HuTu-80、人肾细胞腺癌细胞；ACHN、人子宫内膜低分化腺癌细胞；EAG3、大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞；PC-12 [PC12]

甲状腺

 人甲状腺鳞癌细胞；SW579 [SW 579；SW-579]、人髓样甲状腺肿瘤细胞；TT、人滤泡状甲状腺癌细胞；FTC-133、人低分化甲状腺乳头状癌细胞；B-CPAP

人甲状腺癌细胞（未分化）、8305C、ACT-1、（乳头状）B-CPAP、BHT-101、C643、CAL-62、HTh-7、Hth83、KHM-5M、KMH-2、KTC-1、Ocut-2C、TTA1、ARO、FRO

人甲状腺鳞癌细胞SW579 [SW 579; SW-579]、人髓样甲状腺肿瘤细胞；TT

胸腺：人胸腺激酶缺陷型细胞；143TK-、犬胸腺细胞；cf2Th 中国食品药品检定研究院

肾上腺：SW-13、 人肾上腺皮质腺癌细胞；NCI-H295R 、人肾上腺神经母细胞瘤细胞(脑转移)；KP-N-NS、红色荧光蛋白和萤光素酶标记的SW13-luc2-tdT 、大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞；PC-12 [PC12] 、

胰腺

： 人胰腺癌细胞；PANC-1；人胚胎胰腺组织来源细胞；CCC-HPE-2 ；人胰腺腺泡上皮癌；HPAC；人胰腺癌细胞；AsPC-1；人胰腺导管癌细胞；CFPAC-1；人原位胰腺腺癌细胞；BxPC-3 ；人胰腺癌细胞；HS 766T ；人胰腺癌细胞系；SW 1990

肺腺： 人肺腺癌细胞；Calu-3 、人非小细胞肺腺癌细胞；NCI-H157 、人低分化肺腺癌细胞；SK-LU-1、人非小细胞肺腺癌细胞；NCI-H1975、人非小细胞肺腺癌细胞；NCI-H2087、人肺腺鳞癌细胞；NCI-H596、人肺腺癌细胞；NCI-H2009

就重点原代培养中常见痛点问题：细工前面已有介绍部份，解决方案讨论黑点，生长慢、成瘤不稳定、离体首代消化不下来、简易单克隆法、稳转株筛选法、冻存复苏，都有充足技术储备。平时培养过程中问题解决欢迎讨论。

前期相关各种难点痛点都可讨论与验证（邮件沟通，注明实验室名称，无血清体系方案标明，验证时间相对长）