国内细胞建系，无解问题参考。（问题细胞常规解决都是丢弃为主，以下问题解决参考统计目的是任何问题分析清楚原因，给解决问题找到清晰解决思路为目的，还在统计中，不对处老师提携指点）

种子库试剂、耗材、手法、经验等长期评测讨论问题汇总，

进口耗材试剂为主，国产替代为辅助，相关长期问题统计。

目的：国内建系参考目的,含血清为主、血替为备份。含血清要点，问题痛点统一后，易重复，

含血清理由：国内几十年培养大多数都很熟悉培养特性，问题解决技术储备多，国内建系各方面资源充足，以下所有解决问题参考，都围绕着建系目的。

以下几点来自案例细胞解决，结合上述要求，

  常见问题关于黑点

细工建议参考，用对试剂耗材（种子库级别细胞不建议用便宜试剂，保种上百只种子细胞，也用不了多少钱的）胰酶轻柔处理（避免枪直接吹打细胞损伤也是较重要指标参数），几代或十几代后，黑点会全部消失。这个建议也只是救助办法参考建议，经历过黑点的细胞，建议重新保种国内正规库来源细胞。

  问题细胞系生长慢-原代生长慢-细胞养几代后就爬爬这种情况

    细工建议参考 给出方案是进口瓶培养（康宁，nunc,德国产细工全部现货） ，种子库级别试剂（三千以上胎牛，我司验证五年以上南美）我司培养基或者是GIBCO培养基，放足培养基（多些也没关系）几天不动，看下恢复情况，结合我司胰酶（无损消化）传几代应该能找回较好状态，该方法也适合细胞养几代后就爬爬这种情况（上述方法也适合细胞养传代后细胞就爬爬这种情况，该因素原因很多，具体情况集体分析）该方法也建议原代首代培养（类器官）就是普通培养基加胎牛（因子贵，lag phase长、无血清不稳点）全部能替代，细胞够多或稳定后在上无血清可做参考。类器官配套耗材U型低（不加辅助条件成球）及磁珠配套磁力成球可来信告知索取资料及技术讨论。邮件联系

气泡培养伴随细节处：

吸液按到底，很多会忽略。大部分问题可解决，

上述问题细工统计解决问题比较顺利，大部分也没有常规判断的支原体等问题。23年解决几个案例非常成功。

成瘤不稳定组参考，首发少数技术老师参考

瓶，慢养慢传代慢生长，无损胰酶，少二氧化碳，减缓生长，减缓分化，理由：来自成干成球培养，难养细胞株痛点统计规律相似特点。分出一批评测，操作更简单，给成瘤不稳定组，提供一组备份条件，从成干特点上看，优势挺大的，也给出一套备份技术储备。

提醒：这类问题如有，培养部分上述注意外，种子来源非常重要，如是长期课题，种子建议国内正规库重新订购，并把试剂耗材部分尽量于正规库一致，一组，上述瓶并减二氧化碳一组，成干厌氧培养可查减缓细胞分化（理由一组救治培养,千万别图块）

细胞自动化相关技术统计储备，

1：细胞消化（细胞工厂含血清方案）难消化细胞统计，容错率及应用性广方案统计（高通量转染细胞处理部分技术储备）。

2：悬浮贴壁反向训化，避免细胞分化，超量培养应用统计。

3：冻存：免疫悬浮，原代上皮，等对冻存要求高，或负80常年冻存前技术统计与推广。

4：正常上皮建系，单克隆，大规模培养等，可行方法反复验证。

5：高通量培养与转染，培养相关技术储备。