如何快速而准确地鉴定蝙蝠中的狂犬病毒？(1)

前言：

目前中国的狂犬病监测主要是在家养动物（狗和猫）中进行，而对野生动物的狂犬病监测则还是一个薄弱环节，与美国和其他发达国家相比，每年检测的数量差距很大。绝大多数新型狂犬病毒都是在蝙蝠中发现的，其中可能有现有狂犬病疫苗预防效果很差甚至完全无效的新型狂犬病毒。因此让国内更多的狂犬病监测机构掌握在蝙蝠中快速而准确地鉴定狂犬病毒的方法很有必要。

以下介绍世界顶级狂犬病专家Charles E. Rupprecht博士主持撰写的一篇最新相关论文供参考。此论文去年发表在专业杂志《Zoonotic Disease (人兽共患病）》上，论文的题目是《Use of a Direct, Rapid Immunohistochemical Test for Diagnosis of Rabies Virus in Bats（用直接、快速免疫组织化学试验鉴定蝙蝠中的狂犬病毒）》（见参考文献）。

　　摘要：

狂犬病是一种由狂犬病毒(RABV)等丽沙病毒（lyssavirus）传播引起的人畜共患脑炎，是所有传染病中致死率最高的。已提出到2030年实现消除犬类引起的人类狂犬病的全球规划。对于加强监测以发现感染、在暴露风险评估期间向公共卫生和兽医专业人员提供信息以及支持总体规划目标的实现而言，敏感、特异和廉价的诊断检测是必要的。已使用多种实验室技术来确认狂犬病疑似病例。检测脑内丽沙病毒抗原的一种方法是直接快速免疫组织化学试验(dRIT)，只需使用光学显微镜，适合在野外条件下使用。除了狗，其他主要的RABV宿主存在于哺乳动物中的非专一食肉动物和蝙蝠中。迄今为止，dRIT的使用主要用于诊断可疑的非专一食肉动物的RABV。本研究的目的是评估dRIT与金标准即直接荧光抗体测试(DFAT)相比对蝙蝠狂犬病诊断的有效性。来自亚利桑那州和德克萨斯州的21个物种的264只可疑蝙蝠的大脑被用于评估dRIT。dRIT的总体敏感性为100% (0.969 ~ 1.0，95% CI)，特异性为94.6% (0.896 ~ 0.976，95% CI)，与DFAT相当。这项初步研究证明了dRIT在确认蝙蝠RABV感染方面的效用。未来的研究应包括更多的地理学、丽沙病毒和哺乳动物物种代表，以便在加强狂犬病监测期间更广泛地应用，并根据需要对标准实施方案进行任何可能的调整。

关键词: bat（蝙蝠）; diagnosis（诊断）; direct rapid immunohistochemical test（直接快速免疫组化试验）; encephalitis（脑炎）; lyssavirus（丽沙病毒）; rabies（狂犬病）; surveillance（监测）; wildlife（野生动物）; zoonosis（人兽共患病） 

1. 引言

狂犬病是由弹状病毒科(Rhabdoviridae)丽沙病毒属(Lyssavirus)的RNA病毒感染引起的一种急性进行性脑炎。这种人兽共患病在全球分布，每年造成数百万人暴露和数万人死亡。在过去的60年里，有超过16种不同的丽沙病毒被发现，还有一些在分类学上正在被考虑是否是新的物种。在全球范围内，由丽沙病毒引起的大多数死亡是由于被感染狂犬病毒的狗咬伤。然而，所有哺乳动物都被认为易受RABV感染。RABV的重要储存宿主包括非专一食肉动物，如犬科动物(如家犬)、鼬獾、狐狸、猫鼬、浣熊、臭鼬以及多种蝙蝠。在整个美洲，迄今为止发现的唯一的丽沙病毒就是RABV（经典狂犬病毒）。

通常，作为典型的嗜神经病原体，动物狂犬病的诊断包括在死后证明在中枢神经系统中存在特定的病毒抗原或核酸。直接荧光抗体试验(DFAT)是一种金标准方法，用于检测疑似病例大脑中的丽沙病毒抗原。除了DFAT，直接快速免疫组织化学测试(dRIT)也是一种推荐的验证方法，使用光学显微镜和生物素标记抗体观察中枢神经系统内神经元内的包含体（inclusions）。近几十年来，dRIT已被应用于加强非洲、欧亚大陆和美洲的狂犬病监测。

在美洲，消除犬类引起的人类狂犬病的规划已在本区域取得重大进展。今天，该地区的人类和家养动物病例主要是由RABV通过狂犬病野生动物，特别是蝙蝠传播引起的。在北美，犬类RABV的延续已经被消除，大多数dRIT应用都支持加强狂犬病监测(ERS)活动，重点是对自由放养的非专一食肉动物(如浣熊)进行口服疫苗接种。相比之下，大多数蝙蝠狂犬病病例是在人类暴露后由公共卫生实验室发现的。在ERS（加强狂犬病监测）和未发生人类暴露的背景下，本研究的目的是评估dRIT在美国自然感染RABV的蝙蝠中诊断RABV的潜在效用。鉴于迄今为止对多个物种进行ERS（加强狂犬病监测）的进展，我们假设我们的发现将支持dRIT作为一种有用的诊断测试的好处，并应用于其他可疑野生动物，以确认受影响蝙蝠种群中RABV的存在。

（未完待续）　　

参考文献：

Charles E. Rupprecht，et al., Use of a Direct, Rapid Immunohistochemical Test for Diagnosis of Rabies Virus in Bats，Zoonotic Dis. 2022, 2(1), 1-8;　https://doi.org/10.3390/zoonoticdis2010001.