RNA 干扰 (RNAi) 已成功用于降低靶基因表达并在不同物种中诱导特定表型。 这是一种研究基因功能，并具有管理害虫种群和减少疾病病原体的潜力的优异的工具。然而，尚不清楚不同的给药方法在干扰蜜蜂基因方面是否同样有效。因此，该研究比较了喂食和注射小干扰 RNA (siRNA) 对 α-氨基己二酸半醛脱氢酶 (ALDH7A1)、4-香豆酸-CoA 连接酶 (4CL) 和热休克蛋白 70 (HSP70) 的信使 RNA (mRNA) 水平的影响。在使用 siRNA 注射的实验中，作者比较了不同 RNAi 分子的功效，虽然其起效时间不同，但都能有效降低靶基因的表达，且至少能持续48小时。一般来说，同一生物体不同靶基因的敲低效应也不同，这取决于siRNA的具体结构和RNAi的分子剂量。这可以解释为什么 HSP70 表达早在 siRNA 注射后 8 小时就开始下降。然而，ALDH7A1 和 4CL 的表达直到 16 小时后才开始下降。此外，注射 0.5 μg siRNA 可降低 HSP70 的表达，而 ALDH7A1 和 4CL 需要注射 1 μg siRNA（图 1）。
图 1. 蜜蜂注射和饲喂siRNA后的存活曲线
喂食和注射 siRNA 都成功地抑制了基因表达，但喂食比注射相比，需要更大量的 siRNA。 我们发现 siRNA 处理的蜜蜂和对照组之间的蜜蜂死亡率没有差异。这表明两种siRNA给药方法都不会影响蜜蜂的存活率。注入 siRNA 时，只需 1 μg 即可达到最高水平的干扰，而注入 siRNA 时则需要 10 μg。这表明基因敲除的效果取决于siRNA的传递方式和剂量（图 2 ）。
图 2. siRNA对蜜蜂脑中HSP70 mRNA转录的影响
注射和喂食各有优缺点。注射具有重要的优势，它允许研究人员将 siRNA 立即递送到组织或血淋巴中，从而避免可能的屏障，如血脑屏障或肠道上皮细胞，这可能是喂食中的问题。另一个优点是，与通过浸泡或在某些情况下通过喂食的方式相比，带入生物体的 dsRNA 的确切数量是已知的。然而，这种方法有一些缺点：诸如针头的选择、注射的角度以及注射的体积和位置等因素都非常重要，并且在不同生物体之间差异很大。喂食也有很多好处。它易于操作，方便，对昆虫的伤害较小。它在小型昆虫中比较有优势，这些昆虫使用显微注射更难操作。同时，该方法也非常适用于害虫防治基因的筛选。然而，喂养并不适合所有物种。总之，这一研究结果表明，喂食和注射 siRNA 都有效地干扰了蜜蜂的基因。但是，不同的方法的适当性将取决于具体情况。https://doi.org/10.3390/insects13100928
https://blog.sciencenet.cn/blog-3521522-1360145.html
上一篇：
[转载]每日科研进展 l 2022.10. 19 l 综述：作为化学杀虫剂替代品的dsRNA生物控制的生产策略下一篇：
[转载]每日科研进展 l 2022.10.21 l RNA干扰不能在鳞翅目昆虫中操作？纳米载体打破草地贪夜蛾所有发育阶段的瓶颈
