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[转载]每日科研进展 l 2022.10. 17 l 用于规模化生产dsRNA 生物农药的新型平台

已有 1360 次阅读 2022-10-17 11:15 |系统分类:科研笔记|文章来源:转载

用于规模化生产dsRNA 生物农药的新型平台

RNA 干扰 (RNAi) 是真核细胞进化出的用于调节基因表达的最保守的途径之一。RNAi 利用不可翻译的双链 RNA (dsRNA) 分子来隔离或降解 mRNA 。在 RNAi 中，专门设计的外源性 dsRNA 传递到细胞可以使靶基因沉默，这种现象已在许多功能研究中得到利用，并在生物农药应用中进行了大量探索。寻找安全和可持续的作物害虫管理方案推动了减少无机农药使用，以降低对生物多样性影响的需求。用 dsRNA 喷雾剂替代无机农药的前景越来越受重视，这得益于其高靶向特异性和低环境影响。然而，要使 dsRNA 进入农药市场，它必须以具有成本效益和可持续的方式生产。在本项研究中，开发了一种高产表达培养基，与使用 1 mM IPTG 的表达培养基相比，该培养基产生高达 15 倍的 dsRNA 产量。同时，研究人员还优化了一种产生高质量 dsRNA 的低成本纯化方法。此方法无需使用商业试剂盒或商业核酸酶中常见的危险化学试剂来消除污染 DNA 或单链 RNA (ssRNA) 。该生产平台是可扩展的，从 259 毫克湿大肠杆菌细胞颗粒中可产生 6.29 毫克 dsRNA（图 1）。