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RNA 干扰SfDicer2基因可以抑制白背飞虱的蜕皮和展翅
核糖核酸内切酶 2 (Dicer2) 在 RNA 干扰 (RNAi) 途径中发挥各种生理作用,通过将双链 RNA 片段化以产生小干扰 RNA,然后介导基因沉默。Dicer2是参与RNA干扰的的关键内切酶,在基因调控和抗病毒免疫中发挥重要作用。该项研究利用白背飞虱的转录组和基因组信息获得 Dicer2 序列(图 1.),并利用实时定量PCR和 RNA 干扰 (RNAi) 技术研究了蜕皮和翅膀扩张调控的时空特征和功能。
图1. 白背飞虱SfDicer2 基因结构分析
SfDicer2 的表达在白背飞虱的若虫阶段呈现波动表达。其在蜕皮过程中显著下降,在若虫期和成体脂肪体中表现出最高的转录水平(图 2)。
图2. 白背飞虱SfDicer2 基因的时空表达分析
SfDicer2沉默后,总死亡率为42.69%;其中18.32%的昆虫因无法蜕皮而死亡。与 dsGFP 或水的影响相比,44.38% 的 SfDicer2 沉默的昆虫在成功羽化后表现出翅膀畸形(图 3)。
图3. 白背飞虱SfDicer2 基因干扰后的死亡率、蜕皮障碍及展翅障碍
在 SfDicer2 RNAi 后,几丁质酶、几丁质脱乙酰酶、海藻糖酶、几丁质合酶 1 和翅膀扩张相关基因的表达被显著抑制(图 4)。
图4. 沉默白背飞虱SfDicer2 基因后对其他基因的影响
这些发现表明 SfDicer2 通过影响与几丁质合成和降解相关的基因来控制蜕皮,并通过改变白背飞虱中翅膀伸展相关基因的表达来调节展翅。
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