RNAi介导的茶尺蠖解毒相关基因沉默

茶尺蠖是以茶叶为食的主要害虫之一。目前，主要的防治方法是化学防治，但长期使用杀虫剂会使得害虫产生抗药性。抗性机制之一是相关解毒酶的上调。

在本研究中，从溴氰菊酯处理的斜纹夜蛾幼虫转录组数据注释的基因序列中筛选出四个表达增加的基因，分别是酸性磷酸酶EoACP138和细胞色素P450EoCYP316、羧酸酯酶EoCarE592和乙酰胆碱酯酶EOACH989。

分别用溴氰菊酯、毒死蜱和甲氰菊酯刺激斜纹夜蛾4龄幼虫，用qRT-PCR检测基因表达水平。结果表明，在三种杀虫剂的刺激下，这四个基因的表达都显著增加。

图 1. 毒死蜱、溴氰菊酯和甲氰菊酯刺激后四龄幼虫的相关基因表达情况

利用RNAi技术沉默了斜纹夜蛾四龄幼虫EoACP138、EoCYP316、EoCarE592和EoAchE989基因的表达。通过qRT-PCR测定了经dsRNA处理和农药刺激的幼虫中上述基因表达水平的变化。在取食dsRNA后，靶基因被有效沉默。

图 2. RNAi抑制解毒相关基因的效率分析

图 3. 饲喂dsRNA后对茶尺蠖死亡率统计

经过随后的生物测定分析发现，在受dsRNA干扰的幼虫中观察到对农药更高的敏感性和更高的死亡率。

图 4. RNAi干扰相关解毒基因后茶尺蠖对农药的耐受性分析

上述基因与斜纹夜蛾的解毒代谢有关，为进一步研究斜纹夜蛾的抗药性机制奠定了基础。

原文链接：

https://doi.org/10.3390/genes13071141