Engineering of cellobiose phosphorylase for the defined synthesis of cellotriose

用于确定合成纤维三糖的纤维二糖磷酸化酶工程

来源：Applied Microbiology and Biotechnology

IF：4.813

摘要：

纤维糊精是一种不易消化的低聚糖，作为潜在的益生元引起了食品工业的兴趣。它们通常通过纤维素的部分水解产生，形成具有不同聚合度（DP）的低聚糖的复杂混合物。在这里，我们探讨了纤维三糖作为产品的定义合成，因为这种低聚糖被认为是混合物中最有效的益生元。为此，从纤维二糖和α-D-葡萄糖1-磷酸分别作为受体和供体底物开始，将来自纤维单胞菌uda的纤维二糖磷酸化酶（CBP）和来自纤维素梭菌的纤维糊精磷酸化酶（CDP）评估为生物催化剂。CDP酶被证明可以快速拉长链，使其达到更高的DPs，即使在经过广泛的诱变后也是如此。相比之下，发现CBP的优化变体可将纤维二糖转化为纤维三糖，摩尔产率为73%。最终可溶性纤维糊精混合物（DP2-5）中的纤维三糖含量为82%，从而得到迄今为止纯度最高的纤维三糖产品。有趣的是，该反应甚至可以从葡萄糖作为受体底物开始，这将进一步降低生产成本。