昨天去大神实验室网页（http://zlab.mit.edu/team.html）转的时候发现还是上次那个样子没有一点更新，第一反应就是这不科学啊，Yinqing Li的单神经元转录组的文章（Div-Seq）在去年就在Science上出来了，然后就PubMed检索了一下，发现了这篇文章。说起来也是很简单，Cpf1不同于Cas9之处就是它自己可以根据需要将crRNA切割并形成有效的复合体（图1）。也就是说理论上只需

图1来源：http://www.nature.com/nbt/journal/v35/n1/full/nbt.3737.html

将多个crRNA线性排列在一个启动子之后，就可以实现用一个质粒完成多个基因的编辑了（图2a）。然后他们就设计了单个crRNA以及不同长度的串联靶标序列和Cpf1识别序列的组合来检测其对多基因的编辑效果，结果显示多个串联crRNA表达后对每个基因的编辑效率都蛮高（图2b），随后在小鼠大脑内实现了三敲之后整篇文章的重点结束。

图2来源：http://www.nature.com/nbt/journal/v35/n1/full/nbt.3737.html

   通过这篇文章咱又学习了一点：Cpf1具有多基因编辑的能力。这和之前咱介绍的借用tRNA处理机制实现多基因编辑的方法（戳此查看）相比而言，需要的序列更短了，对于全基因组范围内高通量基因编辑的实践意义也是非同小可。为啥？因为需要的crRNA长度更短呗，更容易合成和操作，不同crRNA之间发生重组的概率也得以降低。

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参考文献：Multiplex gene editing by CRISPR–Cpf1 using a single crRNA array