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磷是植物生长所必需的大量元素之一,土壤有效磷是养分循环测定中的常规内容。土壤有效磷的测定需要根据土壤性质和通过试验选用适宜的浸提剂,通常,中性和石灰性土壤可用碳酸氢钠浸提;对中性和酸性土壤,可用碳酸氢钠或者氟化铵-盐酸浸提。浸提后加钼剃抗显色,比色测定。具体步骤可参考GB7853-87(酸性土壤)或GB12297-90(碱性土壤)。
近期,实验室完成了近1000个样品的有效磷测试,测定过程中发现了几个容易带来疑惑的问题,包括为什么要加活性炭?空白对照为什么会比待测液的颜色还要深?到底该用哪个波长?在此一一解答,希望给需要的同学和老师提供参考。
(1)为什么要加活性炭?
加活性炭是为了去除有机质的影响。土壤样品中的有机质提供磷素吸附位点,会导致磷素被吸附固定,从而影响土壤有效磷的准确测定,因此,测定过程中通常利用无磷活性炭来吸附有机质,以消除上述影响。提醒注意的是,活性炭对PO43-有明显的吸附作用,当溶液中同时存在大量的HCO3-离子时会饱和活性炭颗粒表面,从而抑制活性炭对PO43-的吸附作用。所以一般测中性和碱性样品时才添加活性炭。
(2)空白对照为什么会比待测液的颜色还要深?
这时候要考虑活性炭是不是无磷活性炭。在测定过程中发现,很多厂家提供的“无磷”活性炭其实含有大量的磷,添加前最好进行洗脱。洗脱方法可参考:含磷较多时,先用2mol·L-1HCl浸泡过夜,用蒸馏水冲冼多次后,再用0.05 mol·L-1NaHCO3浸泡过夜,在平瓷漏斗上抽气过滤,每次用少量蒸馏水淋洗多次,并检查到无磷为止。如含磷较少,则直接用NaHCO3处理即可。
(3)到底该用哪个波长?
去除有机质的影响后可以选用700nm波长进行比色。
如果紫外分光光度计波长允许,碱性土壤样品建议选用880nm进行比色,并且前述步骤可以不用添加活性炭。经试验发现,880nm处紫外对有机质基本没有吸收,能够准确地对土壤有效磷进行测定。
参考文献:张飞龙. 2016. Olsen法测定土壤中有效磷的方法优化及检测研究. 西藏农业科技, 38(4): 33-37.
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