在纸浆造纸过程中，造纸厂会产生大量固体废物，称为纸浆和造纸厂污泥（pulp and paper mill sludge，PPMS）。在南非，已经产生了40-50万吨PPMS，这使得纸浆和造纸工业成为污染最严重的行业之一。PPMS中含有有机和无机材料，其中大多数是有机材料，包括造纸原材料木材中的木质纤维素残留物。生物精炼厂可以将这种木质纤维素水解为单糖，将单糖作为原料经过化学和微生物转化变为生物燃料（乙醇、丁醇和碳氢化合物）、各种有机酸和其他更高价值的产品。纤维素酶可以水解木质纤维素，它由3种不同的酶组成，即内切葡聚糖酶（1, 4-β-D-glucanohydrolase），外切葡聚糖酶（1, 4-β-D-glucan cellobiohydrolase）和β-葡萄糖苷酶（β-D-glucopyranoside glucohydrolases）。β-葡萄糖苷酶的活性是决定纤维素转化为葡萄糖的限速步骤，大多数纤维素酶被其产物葡萄糖抑制。因此，寻找一种新的微生物纤维素酶生产者，并优化β-葡萄糖苷酶的葡萄糖耐受性变得十分关键。真菌和细菌都能产生纤维素酶，而真菌能分泌更多的纤维素酶，其酶具有更强的综合能力。

南非KwaZulu-Natal大学Nivisti Singh团队使用连续稀释法从树皮和土壤中分离获得了46种真菌分离株，34种分离株具有β-葡萄糖苷酶活性，其中27种分离株显示出中等或较高的酶活性。在第二次筛选时，生产β-葡萄糖苷酶的真菌分离株减少到13种。使用定量和定性方法筛选具有内切葡聚糖酶、外切葡聚糖酶的分离株，通过ITS扩增鉴定出7种真菌分离株，分别为Aspergillus japonicas VIT-SB1 (C1)、 Neofusicoccum parvuma (C2)、 Meyerozyma guilliermondi XQ9 (C4)、 Trichoderma atroviride (MS8)、 Lasiodiplodia iranensis (PB8)、 Chaetomella sp. BBA70074 (PS1)、 Neofusicoccum parvumb (MB5)。进一步实验筛选7种分离株β-葡萄糖苷酶最高的葡萄糖耐受量，鉴定为Chaetomella sp. BBA70074分离株PS1对葡萄糖的耐受性最高，在0.8 M葡萄糖存在下保留10%的β-葡萄糖苷酶活性。Chaetomella sp. BBA70074的β-葡萄糖苷酶分子量为170 kDa，pH和温度最佳值分别为6 °C和70 °C。未来的研究将包括优化Chaetomella sp. BBA70074葡萄糖耐受酶的生产。

27种真菌分离株β-葡萄糖苷酶活定量

Quantification of β-glucosidase activity for the 27 fungal isolates with the largest precipitate zones from qualitative screening in the crude enzyme extracts produced at 30 °C, 125 rpm and 4-nitrophenyl-β-_D-glucopyranoside as a substrate at OD₄₁₀ nm (Mean ± SD, N = 4).

13种真菌分离株内切葡聚糖酶、外切葡聚糖酶活定量

Quantification of endoglucanase and exoglucanase activity of the 13 isolates that displayed the highest β-glucosidase activity using the crude enzyme extract produced at 30 °C, 125 rpm and the DNS assay with avicel and CMC as substrates, respectively at OD_{540 nm} (Mean ± SD, N = 4).

7种β-葡萄糖苷酶的葡萄糖耐受性

Glucose tolerance of crude β-glucosidases produced by Aspergillus japonicas (C1), Neofusicoccum parvum_a (C2), Meyerozyma guilliermondi (C4), Trichoderma atroviride (MS8), Neofusicoccum parvum_b (MB5), Lasiodiplodia iranensis (PB8), Chaetomella sp. (PS1), at 30 °C, 125 rpm using 4-nitrophenyl-β-_D-glucopyranoside as a substrate at OD_{410 nm} (Mean ± SD, N = 4).

该研究鉴定出满足工业生产的新的纤维素分解真菌分离株，该分离株生产的β-葡萄糖苷酶具有较好的葡萄糖耐受性，有希望为生物精炼厂大规模生产降低成本。