从6月22养细胞到今天已有半月了，细胞也经历了从濒死到重生的过程，有感养细胞之需耐心与信心，发此文与大家分享这包含各种滋味的过程和乞求大家不吝赐教，使我的细胞能够更好。

细胞状态不好是一件让人很头疼的事，因为细胞培养有好多环节，而你不知道到底是哪个环节出了问题。如果你够霸气，可以直接把细胞扔了，重新复苏重新养，然而你很难这么霸气，因为细胞不可能多到失败了就扔，失败了就扔的地步。而话又说回来，你重新复苏能解决的问题只有操作不当引起的问题，否则细胞还是会出问题。下面我就简单说一下我的艰难而又华丽的细胞救赎。

1、与细胞关心最密切的是三样东西，培养基和培养瓶和培养箱。因为细胞与此三件东西接触的时间最久，所以出现问题应先拿这三件东西摸。我先排除培养瓶的因素。

等细胞有较可观的数目时，消化转移，将消化好的细胞进行吹打时要轻轻吹打，而且不要反复吹打，相同地方吹打一遍即可，虽然此法会浪费一些细胞但也会尽可能少的将杂质带入新培养瓶，转入新瓶培养，如是重复，至第三个新瓶还是不能解决问题，则可排除培养瓶问题。我重复几次后，观察发现，刚换瓶时细胞的状态有所好转，但培养一段时间后老问题依旧，所以我排除培养瓶的问题，开始重点考虑培养基问题。将先前用过的培养基换成别人用过没有问题的培养基(推荐），或者自己重新配新鲜培养基。由于我先前用的是我师姐配的培养基，所以只能用我7月5号自己重新配的培养基。结果发现，自从用了7.5号的培养基后细胞状态一天比一天好，因此到此问题找到，培养基出了问题。

所以接下来就不用摸了，但是不是每个人摸到这就可以搞定自己的问题，下一步要排除培养箱的问题，如果跟自己共用培养箱的其他人的细胞没问题，那培养箱可能没问题，或者只有你那层的培养板有问题，所以你要对你的培养板进行一次大消毒，首先把你的培养板拿出来，照紫外消毒（跟实验前一样，紫外30min即可，为了保证杀毒效果，我一般会用酒精灯通体烤一遍，然后再用75℅的酒精消毒，最后放入培养箱中即可了，培养一段时间之后观察细胞状态来分析问题的出处。

2、虽然培养基和培养瓶出问题的可能性大一些，并不代表其他环节不出问题，比如吸管和吹管是否干净无毒，胰酶是否污染，以及操作过程中是否对手充分消毒等。为节省时间，此一般不再单独排除，比如手消毒问题，每次试验要带手套并且用酒精充分擦拭，基本可排除污染的可能，而吹管和吸管用时一定要泡好酸以及高压好，我用的时候一般还要在酒精灯上充分烧一下，等凉却了再用，这样就可以忽略小环节的问题。

声明：以上内容均属原创，仅代表个人观点，初学者难免有做的不当之处，望大家批评指正和补充，万分感激。希望有成功救活被污染细胞的高手多多赐教！

细胞图：前面几张是细胞状态很糟糕的时候，通过一张图可以看出，瓶上到处是黑点点，也不知是什么东东，我之所以换瓶也是想甩掉哪些可恶的点点。但是一直没甩掉，所以怀疑是细胞内部或者培养基里面的。

后面几张图也就是到7月7号，短短两天（7月5号更改培养基），细胞状态已远远好于以前。