我们实验室将光控离子通道（channelrhodopsin）和绿色荧光蛋白（greenfluorescent protein，GFP）连接合成融合蛋白，表达在HEK293细胞上。然后我对表达有绿色荧光的细胞进行电生理记录。在荧光显微镜下，正常表达光控离子通道的细胞中，绿色荧光蛋白也同样表达在细胞膜上（图中箭头所指→）。但是我看到有些死细胞同样会发绿色荧光（图中三角所指△），而且非常的亮。本来正常的活细胞是不会有荧光的，但是在它们死后，却会发出荧光，这种荧光称为自发荧光（autofluorescence），这是细胞的鬼火么？

自发荧光对做细胞生物学的伙伴们一定不陌生。不但在形态组织学实验中欺骗了我们的眼睛，而且会在流式细胞仪（FACS）试验中造成较大的干扰。在形态学实验中，如果在绿色滤光镜下看到不确定的发光点，换到红色滤光镜下依然有很强的发光点，就很有可能是自发荧光，拍照的时候要避免这些点。在流式细胞仪分选时，也同样要用另一种颜色的荧光来做负对照，排除死细胞的自发荧光。

但是死细胞为什么会发荧光呢？在wikipedia上罗列出了几个细胞内的发光分子，大多数是来自于有芳香环的氨基酸集团。可是活细胞同样有这些氨基酸在，为什么就不发光呢？小水獭猜想很可能活细胞中各种膜结构完好，各种细胞器内部物质不自由泄露，比如溶酶体这些pH值和细胞内液差别较大的内部液体被膜结构所隔离。而死细胞中，膜结构被破坏发生损伤，各种亚细胞结构内部物质互相接触反应，使荧光集团暴露发光。小水獭觉得这是个有趣的现象，但是已有的研究结果的并不透彻。这算是一个开头，小水獭会继续找文献试着弄清楚这个问题。请知道这个问题答案的朋友不吝赐教。

https://en.wikipedia.org/wiki/Autofluorescence