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我想将一基因克隆到质粒载体,并且携带有荧光。但不想产生融合蛋白而影响我的细胞的空间构象,什么质粒符合我的条件,
我若选用的载体pEGFP-N1,会产生融合蛋白,我需要分别产生两者独立蛋白的质粒,各自含有各自的启动区和终止密码子。
你可以选用IRES的质粒。
你的基因插入启动子下游,你的基因后面是IRES序列和GFP的序列,这样,启动子表达后,IRES会被识别并切割,这样,质粒相当于同时分别表达了你插入的基因和GFP,两个蛋白是独立的,而不是融合的。你既可以用荧光来判断表达细胞,而你的基因表达的蛋白不会因GFP的融合而引发可能的空间构向的改变。
这些质粒如pIRES-GFP等信息,
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GMT+8, 2024-10-19 23:15
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