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核酸浓度的定量
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从细胞内抽取核酸主要用于Southern blotting，DNA hybridization及在载体内构筑核酸基因，并作遗传形质转殖、表现的鉴定。使用在这些过程中的核酸的量过与不及均不适宜，因此了解所抽取组织中核酸的量，即可在使用上免去此一困扰。一般完成核酸抽取后，常随即测量其含量，并检测抽取之核酸纯度，作为上述分析过程的参考。
试剂和器具：
1. 微量离心管
2. TE buffer：稀释DNA用(亦可用无菌水来代替)
3. 分光光度计专用之石英比色管（Quartz cuvette）
仪器和设备：
1. 分光光度计（UV spectrophotometer）
2. 4℃冰箱
3. 震荡器
4. 离心机
5. -20℃冰箱
步骤：
1. 将分光光度计打开，热机至少20分钟。
2. 将DNA溶液中取2-5µl，加TE buffer（或纯水）使体积成为1000µl。
3. 将稀释之DNA溶液倒入石英管，以TE buffer（或纯水）为标准倒入另一管。
4. 在波长230-300nm间进行扫瞄，光光度会收图谱及吸收值。
5. 比较在260nm及280nm之读值。
A260/A280>1.7-1.8表示DNA/RNA的纯度高。
A260/A280<1.7表示DNA/RNA的纯度不高，可能需再做一次纯化。
浓度计算(Spectrophotometric conversions):
1 A260 unit of double-stranded DNA = 50μg/μl
1 A260 unit of simgle-stranded DNA = 33μg/μl
1 A260 unit of simgle-stranded RNA = 40μg/μl
1. DNA : 测定样品中的DNA浓度规定为50μg/ml
因此，若由DNA原液取5μl稀释成1000μl (即1 ml)，而A260读值为0.18
，则此稀释样品的DNA浓度(μg/μl)为：
0.18 ×50μg/ml = 9μg/ml
稀释DNA样品中的含量为9μg/ml ×1ml = 9μg---此为每5μl DNA原液
所含有的量，因此原液中的DNA浓度(μg/μl)为：
9μg ÷5μl = 108μg/μl
2. RNA : 测定样品中的RNA浓度规定为40μg/ml (RNA通常为单股)
因此，若由RNA原液取5μl稀释成1000μl (即1 ml)，而A260读值为0.18
，则此稀释样品的RNA浓度(μg/μl)为：
0.18 ×40μg/ml = 7.2μg/ml
稀释RNA样品中的含量为7.2μg/ml ×1ml = 7.2μg---此为每5μl RNA原液所含有的量，因此原液中的RNA浓度(μg/μl)为：
7.2μg ÷5μl = 1.44μg/μl
注意事项 :
通常OD260/OD280＞1.8表示纯化之核酸的纯度很高，而蛋白质含量很少。如果
OD260/OD280＜1.5表示纯化之核酸溶液中含有50%蛋白质及50%DNA。因此最好将前述所得DNA原溶液再重新抽取。
结果：
sample 1 sample 2
（1） A260: 0.287 （1）A260: 0.242
（2） A280: 0.307 （2）A280: 0.224
（3） Ratio: 0.935 （3）Ratio: 1.080
sample 1与sample 2 的DNA纯度皆不高。
讨论：
1、可能做Genomic DNA分离的步骤未做好，如上清液未吸干净，可能残留RNA、蛋白质或多醣类、杂质等。
2、倒掉滤液未倒干净，仍残留其它物质。
3、微量吸管有污染到，而上下吸取混合时未做好及加入的药剂量未完全正确。
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