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Varioskan Flash全波长扫描式多功能读数仪

已有 6903 次阅读 2013-4-12 06:27 |个人分类:生化平台|系统分类:科研笔记| Flash, 扫描

Varioskan Flash四光栅设计,波长自由选择,可用于光密度、荧光和化学发光检测;适用6-1536板型,有三个内置式进样器可选,标配孵育器和振荡器。

功能介绍

1.光密度检测 (Photometric Measurement)

1) 单波长,2)多波长

2. 光密度光谱扫描(Photometric Scanning

如果您不知道您的最佳比色波长时,可以先进行光吸收光谱扫描,仪器将从您设定的起始(Start)波长,每次递进(Step size)扫描到结束(End)波长。注意普通的酶标板对于300nm以前的紫外光有很强的吸收,如果您的检测物质(如核酸)的最大吸收峰在300nm以前,请选购紫外板或石英板。

3. 荧光检测(Fluorometric Measurement)

一般选择荧光顶读(Top),荧光底读(bottom)针对的是贴壁培养的细胞内荧光染料的检测,细胞生长一般不均匀,您可能需要选择多点检测(Multipoint),然后选择您所用的板架(Plate tray)类型,标配的是不带盖的托架(如96-well plate w/o lid),最后通过在孔内的多点,黄色表示选中,紫色表示未选。

1) 单波长,2)多波长

4.荧光光谱扫描 (Fluorometric Measurement

当您不知道您的荧光染料最佳激发和发射波长时,您可以进行荧光光谱扫描,一共要进行2次扫描,第一次发射波长,第二次激发波长,具体方法:首先固定激发波长(Excitation),扫描发射波长(Emission)。注意激发和发射波长之间的差值,如选择5nm激发带宽(Excitation bandwidth),那激发波长(450nm)和发射波长(490nm)之间的差值必须大于19nm;如果选择12nm激发带宽,那激发波长和发射波长之间的差值必须大于26nm。第二次固定发射波长,扫描激发波长。

5.时间分辨荧光检测(TRF Measurement:基本同荧光检测,不同的是要设置延迟时间(TRF delay time)和积分时间(TRF integration time)。

6. 时间分辨荧光光谱扫描(TRF Scanning:基本同荧光光谱扫描。

7. 时间分辨荧光延迟时间和积分时间扫描(TRF Decay)

8. 化学发光检测(Luminometric Measuremen:一般选择高敏模式(Normal),从Measurement time设定单孔的检测时间,从10ms10000ms

9. 化学发光光谱扫描(Luminometric Scanning

操作步骤

1.开启仪器电源开关,仪器启动后会有约2分钟自检,自检完成后,指示灯由黄变绿;

2. 启动Skanlt软件,软件会自动连接到仪器,一般先开仪器,再开软件;

3.点击New Session新建程序或点击Open Session 打开已有程序或该程序已运行的结果;

4.在新出现的对话框内给程序命名,点击Next

5.在新出现的对话框内选择您所用的微孔板,如果您所用的版型是96孔平底板,您可以选择默认版型,否则请选择相应的版型,选定后点击Next

6.出现的主界面有六栏,最上面栏是主面板,包括仪器和程序的所有设置都在这里可以找到;最下面是仪器状态栏,从左到右依次为当前仪器,仪器温度,当前用户和时间。中间四栏包括Session(程序)Steps(步骤)Execution(仪器控制键)Properties (步骤的具体参数或结果)

7. 点击Plate layout(孔板布局)可以设置具体检测的孔。选择右上角wizard进入填充向导。

8.点击protocol后可以在Steps中添加实验方法和步骤。具体方法是按鼠标右键调用步骤清单,或直接点击左边相应的图标.

9. 完成以上工作后,在运行程序前保存所编辑的程序.

10.将待检测板放于载板架上,点击运行程序。

11. 结果导出: Result中增加Report。在参数面板中,将需要保存的参数选中,添加。点击View Report切换到Report面板,对导出结果进行浏览。按保存,填入文件名称(File name),选择文件类型(.xls.pdf.txt),一般保存结果至Excel文件。

注意事项

1. 请将仪器放置在整洁、干燥的环境中,务必远离水槽和风口。

2. 放板前,请确认适配器与所使用的微孔板类型相符,并确认适配器与微孔板放置正确(检查是否平齐)。如果是带盖板,请将板盖去掉。如果测量时需要带盖,请使用适合的带盖适配器(需选配)。微孔板的A1孔对准托架上A1孔的位置。

3. 如发生卡板,请立即关闭电源,手动把板取出。

4. 如果测量的是条板,请关闭仪器的自动板检测功能(软件主面板Settings > Options > Check plate

5. 在仪器内对样品进行孵育时,请使用带盖的微孔板适配器(需选配)。

6. 禁止腐蚀性液体在仪器内进行孵育,如含有DMSO的样品。

7. 测量后,请将微孔板取出。若软件已关闭,可通过板进/板出键取出微孔板。

8. 进样器的维护,进样器使用前需要Prime,使用后需要Empty和清洗(详见自动进样器的维护)。进样针用完需套上保护枪头,放置在进样器架上。

9. 注意3个黑色的插销要保存好,用完自动进样器后要插回原位,以防止外界的光进入检测系统。

10. 如使用微量检测板,请确保微量板已洗干净,检查是否挂液。



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