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凋亡和坏死检测（二）
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流式细胞仪检测凋亡和坏死，我们实验室是用BD Bioscience 公司的FITC Annexin V Apoptosis Detection Kit。主要步骤如下
（1）细胞接种于25 cm2瓶子，细胞密度100万个/瓶。
（2）接种24小时，药物处理。
（3）消化细胞（建议用带EDTA的胰酶，消化充分），并用冷的0.01MPBS清洗两遍。
（4）稀释10×binding buffer成1×buffer（双蒸水配制），每管细胞加1毫升buffer重悬，细胞浓度为100万个/毫升。
（5）取100微升细胞液入流式管，每管加5微升PI和FITC Annexin V，用移液器轻微混匀，室温避光放置15分钟。
（6）加400微升1×buffer，混匀，1个小时内流式细胞仪检测。
有三管细胞作对照
① 不加染料
② 1uM Staurosporine 处理4小时细胞诱导凋亡，只加FITC Annexin V，
③ 细胞煮沸30秒，诱导坏死，只加PI
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