本文“Hydrogen Sulfide Promotes Platelet Autophagy via PDGFR-α/PI3K/Akt Signaling in Cirrhotic Thrombocytopenia”在期刊Journal of Clinical and Translational Hepatology上发表。

投稿：2024年3月19日；修回：2024年5月22日；接受：2024年5月22日；上线：2024年6月17日

研究背景和目的

在我国，将血小板（PLT）计数＜100×109/L定义为血小板减少；血小板减少是肝硬化最常见的实验室检查异常，大约80%的肝硬化患者伴有血小板减少症，其发病机制较复杂，包括肝硬化脾肿大引起血小板被隔离，感染、免疫及凝血异常等导致血小板破坏增加，及肝脏促合成血小板生成素（TPO）减少、HBV/HCV或药物导致肝硬化患者骨髓血小板生成减少等。血小板减少不仅与肝硬化患者预后密切相关，也影响这些患者的侵袭性操作出血风险及医生的诊疗决策。

自噬是将细胞内受损的细胞器和错误折叠的蛋白质输送到溶酶体进行降解，以维持细胞稳态和能量代谢的过程。因此，自噬被认为是一种细胞保护机制。然而，血小板自噬对肝硬化患者的血小板数量和功能的影响尚不清楚。

本研究旨在探讨肝硬化血小板减少症患者血小板自噬的变化，并进一步探讨气体信号分子硫化氢（H2S）调控血小板自噬对肝硬化血小板数量和功能的影响以及分子机制。科学假设如下图。

研究方法和结果

材料与方法：

在体外实验中，从56例肝硬化患者（血小板计数正常者12例，轻度血小板减少症11例，中度血小板减少症20例，重度血小板减少症13例）和56例健康志愿者的外周血中分离出血小板，采用ELISA检测血小板裂解液中的自噬标记物（ATG7、BECN1、LC3和SQSTM1）水平，通过透射电镜观察血小板自噬体的形成。

采用H2S检测试剂盒检测56例肝硬化患者和56例健康志愿者外周血的内源性H2S浓度。使用硫氢化钠（H2S供体）、羟钴胺（H2S清除剂）、AG 1295（选择性PDGFR抑制剂）处理肝硬化重度血小板减少症患者的血小板，采用Western Blot检测自噬相关蛋白LC3和SQSTM1，以及PDGFR/PI3K/Akt/mTOR信号通路蛋白的表达，采用定量DCFH-DA荧光强度检测血小板活性氧水平，采用ATP含量测定反映血小板活力，采用Annexin-V/PI双染色流式细胞术检测血小板凋亡，采用血小板聚集分析仪检测血小板聚集率。

在体内实验中，建立了四氯化碳诱导的肝硬化BALB/c小鼠模型，将肝硬化小鼠分别用生理盐水、硫氢化钠或羟钴胺连续注射15天，每三天测量一次血小板计数和血小板聚集率的变化，并在注射结束后，采用Western Blot检测小鼠血小板中自噬标记物LC3和SQSTM1的表达。

研究结果：

与健康对照组相比，肝硬化血小板减少症患者的血小板自噬标志物和内源性H2S水平显著降低，且降低程度与血小板减少症的严重程度呈正相关；通过透射电镜观察血小板自噬体的形成减少。对于重度血小板减少症患者，H2S以剂量依赖性方式增加了血小板LC3-II表达，降低了SQSTM1表达。同时，H2S处理后血小板的细胞内活性氧水平降低，血小板活力增强，血小板凋亡受到抑制。

机制研究显示，H2S可抑制PDGFR、PI3K、Akt和mTOR蛋白的磷酸化，从而上调血小板自噬。与健康对照组相比，肝硬化血小板减少症患者的血小板聚集率升高，且升高程度与血小板减少症的严重程度呈正相关。H2S体外处理血小板后，血小板聚集率呈剂量依赖性下降。

小鼠体内实验表明，H2S可上调肝硬化小鼠血小板中的LC3-II并下调SQSTM1，同时抑制血小板聚集，但对血小板计数没有显著影响。

总结和展望

血小板自噬下调可能是导致肝硬化血小板减少症的潜在机制；H2S通过PDGFR/PI3K/Akt/mTOR信号通路调节血小板自噬和血小板功能。

引用本文：

Yang HX, Li YJ, He YL, Jin KK, Lyu LN, Ding HG. Hydrogen Sulfide Promotes Platelet Autophagy via PDGFR-α/PI3K/Akt Signaling in Cirrhotic Thrombocytopenia. J Clin Transl Hepatol. 2024;12(7):625-633. doi: 10.14218/JCTH.2024.00101.

原文链接：https://www.xiahepublishing.com/2310-8819/JCTH-2024-00101

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通讯作者

丁惠国

• 首都医科大学附属北京佑安医院肝病消化中心主任，主任医师，教授，博士研究生导师。

第一作者

杨华湘

• 首都医科大学附属佑安医院内科学（消化系病）博士研究生

• 获2022年APASL STC Young Investigator Award奖

Journal of Clinical and Translational Hepatology简介

Journal of Clinical and Translational Hepatology（JCTH，《临床与转化肝脏病杂志》，pISSN: 2225-0719, eISSN: 2310-8819）是由重庆医科大学附属第二医院主办，Xia & He Publishing Inc. （华誉出版社）出版的英文学术期刊，主要收录肝病领域的临床或转化相关的研究论文、综述、述评等。

• Impact Factor 2023: 3.1

• CiteScore 2023: 6.4

期刊主题

JCTH于2013年9月正式创刊，主要收录肝病领域临床或转化相关的研究论文、综述、述评等。JCTH收录主题包括但不限于：

• 临床和基础肝病学新发现

• 肝病机制

• 肝病研究与治疗新技术

• 肝病的流行病学/环境因素

• 免疫系统功能在肝病中的作用

• 急性和慢性肝炎

• 肝硬化

• 遗传性和代谢性肝病及其并发症

• 肝胆疾病

• 肝癌

• 药物代谢

• 腹膜结核（伴门脉高压）

主编介绍

任红教授

重庆医科大学附属第二医院，病毒性肝炎研究所

中国，重庆

Prof. George Y. Wu

Department of Medicine, Division of Gastroenterology–Hepatology, University of Connecticut Health Center Farmington

USA

Prof. Harry Hua-Xiang Xia

广东药科大学第一附属医院，消化内科

中国，广州

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