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中国农业大学田长富教授和张子丁教授团队合作的文章“Cofitness network connectivity determines a fuzzy essential zone in open bacterial pangenome” 已在mLife网站正式上线。该文章主要研究了理想条件下细菌泛基因组各基因对适合度的贡献。通过对富营养条件下中华根瘤菌属菌株的泛基因组Tn-seq数据进行网络分析,发现:基因必需性类别与基因保守水平和网络连接度之间正相关,核心基因组中菌株间共有和特异的必需基因在翻译和细胞包膜生物合成等基本功能中富集,揭示了泛基因组必需与非必需基因的朦胧边界。
大多数计算进化生物学研究认为:在富营养环境下,核心基因对细胞功能是必不可少的,而附属基因则是可有可无的。然而,这一观点很少在泛基因组背景下进行遗传学检验。该研究通过对中华根瘤菌属菌株的泛基因组Tn-seq分析,深入探讨了富营养培养基中各基因对适合度的影响。为了评估基因必需性分类的稳健性,该研究使用三种方法分析了每个菌株的三个独立突变文库,发现隐马尔可夫模型(HMM)方法对突变文库之间的变化表现最为稳健,并且对数据规模不敏感,优于贝叶斯和蒙特卡洛模拟方法。因此,使用HMM方法对基因必需性进行了分类:必需 (ES)、生长有利 (GA)、生长不利 (GD)和非必需 (NE)。结果显示: ES、GA、GD基因在核心基因中富集,而NE在附属基因中富集 (图1); 附属的ES/GA基因对适合度的贡献小于核心的ES/GA基因 (图1);共适合度网络的连接度按ES、GD和GA/NE的顺序递减 (图2); 除了附属基因外,有1599个核心基因在测试菌株中显示出不同的基因必需性 (图3); 核心基因中,菌株共有的和菌株特异的准必需基因 (ES和GA) 在类似的基本功能类别中富集 (图3)。该研究发现了细菌泛基因组中由共适合度网络连接度决定的必需与非必需基因的朦胧边界,为我们理解原核生物泛基因组演化机制提供了参考。
图 1 基因必需性等级与中华根瘤菌属泛基因组中的保守水平相关。(A) 不同保守水平基因之间适合度值的多重比较分析。误差线代表标准差;适合度值通过蒙特卡洛方法计算;ES (必需)、GA (生长有利)、NE (非必需) 和GD (生长不利) 由HMM方法定义;在ES和GA类别中,适合度值依次从保守程度递减的子集I、II和III逐渐增加。(B) 适合度值F高于或低于子集I平均适合度值的ES和GA基因的COG富集分析 (ES为-6.90,GA为-5.46)。图中显示了属于特定COG类别的基因数量,与五个测试菌株中具有COG注释的总基因数量相比,显著富集用红点或红色数字表示 (Fisher精确检验,p < 0.05)。(C) 子集I-III中基因比例的Fisher精确检验 (***p < 0.001)。ES、GA和GD类别富集了子集I基因。
图 2 基因必需性类别与中华根瘤菌属泛基因组成员的共适合度网络连接度相关。(A)基于蒙特卡罗适合度值的共适合度网络分析 (只包括相关度最高的前1%的边)。(B) Module_1的拟合网络。圆点的大小与共适合度网络的连接度成正比。不同颜色表示 (A) 中SF45436的适合度类别。(C) 连接度、平均最短路径长度、接近中心性和拓扑系数的共适合度网络分析。图中不同小写字母表示平均值之间的显著差异 (Tukey HSD检验,校正后的p < 0.05)。
图3 中华根瘤菌属核心基因组中必需与非必需基因间的朦胧边界。(A) 核心基因的必需性类别呈现菌株依赖性。最大似然系统发育树基于五个测试菌株的3284个核心基因,所有分支具有100%的可信度检验支持。(B-C) 共有的 (B) 和菌株特异的 (C) (准)必需核心基因的COG富集分析。(B) 和 (C) 的红色表示Fisher精确检验中p < 0.05。(B) 显示了泛基因组27,724个具有COG注释的基因中每个COG类别的比例及其丰度顺序。
引用本论文:Zhang P, Zhang B, Ji Y, Jiao J, Zhang Z, Tian C‐F. Cofitness network connectivity determinesa fuzzy essential zone in open bacterial pangenome. mLife. 2024;3:277–290.
原文链接:
https://doi.org/10.1002/mlf2.12132
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