所需功能和模块：Discovery Studio Client, DS CDOCKER.

所需数据文件：1EQG.dsv, 1EQD-ibuprofen-conf.sd, 1EQG-ibuprofen.sd

所需时间：15分钟

介绍

CDOCKER是基于CHARMm力场的分子对接方法，这种方法可以产生高精度的对接结果。在本教程中，天然布洛芬配体分子对接回COX-1受体的结合位点中，得到的对接构象和X-ray衍射得到的晶体结构中的配体天然构象进行比较。本教程包括：

·       准备对接体系

·       运行CDOCKER

·       CDOCKER结果分析

·       计算对接结果的RMSD值

准备对接体系

在文件浏览器（Files Explorer）中，找到并双击打开Samples | Tutorials | Receptor-Ligand Interactions| 1EQG.dsv。

在分子窗口中将打开一个带有活性位点的蛋白质三维结构（图1）。

在工具浏览器（Tools Explorer）中，展开Receptor-Ligand Interactions | Define and Edit Binding Site，依次点击Show/Hide Residues Outside Sphere和Show/Hide Sphere。

展开菜单栏View|Transform，点击Fit To Screen将结合位点的氨基酸在窗口中居中显示（图2）。

以上操作可以将结合位点外的残基以及球体隐藏，以便观察对接结果时更加便捷。

找到并双击打开Samples | Tutorials | Receptor-Ligand Interactions| 1EQG-ibuprofen-conf.sd文件。

将打开一个具有随机构象的布洛芬分子（图3）。

运行CDKCKER

在工具浏览器（Tools Explorer）中，展开Receptor-Ligand Interactions | Dock Ligands，点击Dock Ligands (CDOCKER)，打开相应参数面板。

在参数面板中，将Input Receptor设置为1EQG:1EQG。

参数Input Ligands设置为1EQG-ibuprofen-conf:All。

点击Input Site Sphere参数，从下拉列表中选择该sphere的坐标及半径。

展开Top Hits参数，设置Pose Cluster Radius为0.5。

将RMSD阈值设为0.5埃以确保对接构象尽可能具有多样性。

其余参数默认（图4），点击Run运行。

CDOCKER结果分析

作业完成后，在作业浏览器（Jobs Explorer）中，双击完成的分子对接任务，打开Report报告界面，点击View Results，打开对接结果。

1非键相互作用的直观显示与分析

在工具浏览器（Tools Explorers）中，展开Receptor-Ligand Interactions | View Interactions，点击Ligand Interactions。

在视图窗口中，受体蛋白氨基酸残基与配体对接poses间的非键相互作用会通过不同颜色的虚线显示出来，且只有参与了同配体之间的相互作用的残基才会显示。（图5）

点击上述View Interaction工具面板下的Interaction Options，展开如下窗口（图6）。

该窗口中列出DS中所有非键相互作用类型，其中黑色显示表示该蛋白和配体间存在的非键相互作用。

此外，在分子显示窗口任意选中某一虚线，在DS界面的左下方就会显示该非键相互作用类型及距离等相关信息。（图7）

为了更好的观察受体分子与配体对接pose间的相互作用，可以对体系进行旋转以获得最佳的观赏角度。

点击上述View Interaction工具面板下的按钮可以观察不同的对接构象同蛋白之间的非键相互作用。

2生成配体-蛋白相互作用二维平面图

展开Receptor-Ligand Interactions |View Interactions ，点击Show 2D Diagram。

可以看到在一新窗口中打开配体-蛋白相互作用二维平面图，便于我们更直观的观察两者的相互作用及关键的氨基酸和基团。（图8）

3 对接配体和布洛芬天然晶体结构比对

在任务浏览器（Jobs Explorer）中，单击该任务条下（点开前面的+号）Docked Ligands链接。

对接配体将在一个新的分子窗口中打开。

按住CTRL+G，显示分子图形窗口。

展开菜单栏File | Insert From，点击File...，选择Samples | Tutorials | Receptor-Ligand Interactions | 1EQG-ibuprofen.sd。

在同一窗口中插入布洛芬的天然晶体结构1EQG-ibuprofen.sd。

在表格视图中，设置最后一行的Ibuprofen分子的Visible和Visibility Locked为True。

按住CTRL+Down，观察每个配体文件和布洛芬天然晶体结构的比对情况。

可以发现CDOCKER打分最高的位点，即-CDOCKER_ENERGY的值最高，和天然布洛芬晶体结构具有很好的叠合效果。

在表格视图中，选择最后一行的Ibuprofen分子，展开菜单栏Structure|RMSD，点击Set Reference。

在分子窗口中点击鼠标右键，选择Show All，显示所有小分子结构。

展开菜单栏Structure|RMSD，点击Heavy Atoms。

打开一个新的窗口，显示所有10个对接构象同晶体构象之间的RMSD偏差。