D-Lin-MC3-DMA

MCE 国际站：D-Lin-MC3-DMA

品牌：MedChemExpress (MCE)

CAS：1224606-06-7

纯度：99.70%

分子式：C₄₃H₇₉NO₂

分子量：642.09

存储条件：纯品：-20°C，3年；4°C，2年。溶剂中：-80°C，6个月；-20°C，1个月。

运输条件：美国大陆的室温；其他地区可能有所不同。

产品活性：D-Lin-MC3-DMA 是一种可电离的阳离子脂质, 是一种有效的递送 siRNA 载体。

生物活性：D-Lin-MC3-DMA 是一种可离子化的阳离子脂质，是一种有效的 siRNA 递送载体。

体外：MC3 脂质纳米粒的制备 这里我们提供了 FDA 批准的 Patisiran（一种靶向转甲状腺素蛋白 (TTR) mRNA 的 siRNA）中 LNPs 的脂质摩尔比。此配方中脂质的摩尔比为 D-Lin-MC3-DMA: DSPC: 胆固醇: PEG2000-C-DMG = 50:10:38.5:1.5[1]，RNA 与脂质的重量比为 0.05 (wt/wt)。 A. 脂质混合物制备 1. 将脂质溶解在乙醇中并制备10 mg/m 储备溶液。脂质储备溶液可储存在 −20°C 下以备后用。 注 1：可离子化脂质通常是液体。由于其粘度，应始终称重，而不能依赖自动移液器的体积。注 2：胆固醇溶液应保持温度（>37℃）以保持流动性。及时转移胆固醇溶液以避免冷却。2. 按照说明制备脂质混合物溶液。每毫升脂质混合物添加以下物质：548 µL 10 mg/mL D-Lin-MC3-DMA（HY-112251）、254 µL 10 mg/mL 胆固醇（HY-N0322）、134 µL 10 mg/mL DSPC（HY-W040193）和 64 µL PEG2000-C-DMG（HY-145411）[2]。充分混合溶液以获得澄清溶液。该混合物含有 10 mg 总脂质。注 3：脂质的选择和比例可以根据需要改变，这将影响 LNP 特性（大小、多分散性和功效）和所需的 mRNA 量。 B. siRNA 制备 1. 用 100 mM pH 5 醋酸钠缓冲液制备 166.7 µg/mL siRNA 溶液。 注 4：脂质：siRNA 重量比影响包封效率。其他重量比可作为替代配方制备，用户应相应调整。 C. 混合 有三种常用的方法可以实现溶液的快速混合：移液器混合法、涡旋混合法和微流体混合法。所有这些混合方法都可以用于各种应用。值得注意的是，移液器混合法和涡旋混合法可能产生更不均匀的 LNP，包封效率更低，并且容易发生变化。微流体装置能够以高度可控、可重复的方式进行快速混合，从而实现均匀的 LNP 和高包封效率。在这些装置中，乙醇脂质混合物和水溶液在单独的流中快速混合。两股液流混合后形成 LNP，然后将其收集至单个收集管中。1. 移液器混合法：1.1. 移液器吸取 3 mL siRNA 溶液并快速将其添加到 1 mL 脂质混合溶液中（通常使用 1:3 的乙醇脂质混合物与水性缓冲液的比例。）快速上下移液 20-30 秒。1.2. 将所得溶液在室温下孵育长达 15 分钟。1.3. 混合后，将 LNP 在 PBS（pH 7.4）中透析 2 小时，使用 0.2 μm 过滤器进行无菌过滤，并在 4°C 下保存。2. 涡旋混合法：1.1. 在涡旋混合器上以中速涡旋 3 mL siRNA 溶液。然后， 快速将 1 mL 脂质混合溶液加入到涡旋溶液中（通常使用 1:3 的乙醇脂质混合物和水性缓冲液的比例）。继续涡旋所得分散体 20-30 秒。 1.2. 将所得溶液在室温下孵育长达 15 分钟。 1.3. 混合后，将 LNPs 对 PBS（pH 7.4）透析 2 小时，使用 0.2 μm 过滤器进行无菌过滤，并在 4°C 下储存。 3. 微流体混合方法： 1.1 将 3 mL siRNA 缓冲液和 1 mL 脂质混合物溶液以 12 mL/min 的总流速在微流体装置中混合（通常使用 1:3 的乙醇脂质混合物和水性缓冲液的比例）。注 5：可以改变流速比和总流速等参数来微调 LNPs。1.2混合后，将LNPs对PBS（pH 7.4）透析2小时，使用0.2μm过滤器进行无菌过滤，并在4°C下储存。参考文献1. Curr Issues Mol Biol. 2022 Oct 19;44(10):5013-5027。2. Curr Protoc. 2023;3(9):e898。MCE尚未独立证实这些方法的准确性。它们仅供参考。0 --> D-Lin-MC3-DMA 相关抗体：

体内：含有二硬脂酰磷脂酰胆碱（DSPC）的脂质纳米颗粒（LNP）和可电离的氨基脂质，例如二亚油基甲基-4-二甲基丁酸酯（DLin-MC3- DMA) 是有效的体内siRNA运载工具。LNP-siRNA系统经过优化以在小鼠静脉注射后的肝细胞中实现最大基因沉默效力，汤姆摩尔比为 50/10/38.5/1.5 的DLin-MC3- DMA (MC3)、DSPC、胆固醇和聚乙二醇 (PEG)-脂质。DLin-MC3-DMA 具有优化的 pKa 值，可显著增强效力[1]。MCE 尚未独立证实这些方法的准确性。它们仅供参考。

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参考文献：[1]. Kulkarni JA, et al. Design of lipid nanoparticles for in vitro and in vivo delivery of plasmid DNA. Nanomedicine. 2017 May;13(4):1377-1387.

[2]. Ferraresso F, Strilchuk AW, Juang LJ, Poole LG, Luyendyk JP, Kastrup CJ. Comparison of DLin-MC3-DMA and ALC-0315 for siRNA Delivery to Hepatocytes and Hepatic Stellate Cells. Mol Pharm. 2022;19(7):2175-2182.