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CD40L (CD154; TRAP) 是 CD40 (TNFRSF5) 的配体 |MedChemExpress

已有 369 次阅读 2024-10-21 09:49 |系统分类:科研笔记

CD40L/CD154/TRAP 蛋白, Mouse (HEK293, Fc) | 重组小鼠 CD40L/CD154/TRAP 蛋白 (HEK293, Fc)

MCE 国际站:CD40L/CD154/TRAP Protein, Mouse (HEK293, Fc)

品牌:MedChemExpress (MCE)

纯度:Greater than 90% as determined by reducing SDS-PAGE

分子式:Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution of PBS, pH 7.4 or 20 mM PB, 150 mM NaCl, pH 7.4.

分子量:Approximately 46.23 kDa

存储条件:在 -20°C 下可保存 2 年。复溶后,在 4°C 下可稳定保存 1 周,在 -20°C 下可稳定保存更长时间(含载体蛋白)。建议将等分试样在 -20°C 或 -80°C 下冷冻以延长保存时间。

运输条件:美国大陆的室温;其他地区可能有所不同。

产品活性:CD40L (CD154; TRAP) 是 CD40 (TNFRSF5) 的配体,在 T 细胞中产生共刺激信号而发挥上调 IL-4 合成的作用。CD40L 在活化的 CD4+ T 淋巴细胞上特异性表达,参与 NF-κB/MAPK 信号通路。CD40L 还参与 B 细胞的分化、成熟和凋亡。小鼠中 CD40L 蛋白可裂解为 2 种亚型,包括膜状肽 (1-260 a.a.) 和可溶性肽 (112-260 a.a.) (作为整合素的配体)。重组小鼠 CD40L/CD154/TRAP 蛋白 (HEK293, Fc) 全长 146 个氨基酸 (G115-L260),由 HEK293 细胞表达,带有 N 端 hFc 标签。

生物活性:1.通过功能性ELISA测定其结合能力。固定化小鼠CD40 His在2 μg/mL(100 μl/孔)下可以与小鼠CD40配体hFc结合,小鼠CD40配体hFc的EC50为60-300 ng/mL。2.在10 ng/mL人IL-4存在下,使用人B细胞(Ramos)进行细胞增殖测定。该作用的ED50为0.2651 ng/mL,对应的比活性为3.7722×106单位/mg。

基因 ID:21947

描述:CD40L (CD154; TRAP) 是 CD40/TNFRSF5 的配体,通过产生上调 IL-4 合成的共刺激信号发挥作用[1]。CD40L 特异性表达于活化的 CD4+ T 淋巴细胞,并参与 NF-κB/MAPK 通路的激活[2][3]。CD40L 还参与 B 细胞分化、成熟和凋亡[4]。小鼠中的 CD40L 裂解成 2 条链,分别为膜形式 (1-260 aa) 和可溶形式 (112-260 aa),可作为整合素 (ITGA5:ITGB1 和 ITGAV:ITGB3) 的配体。 CD40L/CD154/TRAP 蛋白,小鼠 (HEK293, Fc) 全长 146 个氨基酸 (G115-L260),在带有 N 端 hFc 标签的 HEK392 细胞中表达。

研究背景:CD40 配体(CD40L;CD154;TRAP)属于肿瘤坏死因子 (TNF) 家族,是 CD40/TNFRSF5 的配体,特异性表达于活化的 CD4+ T 淋巴细胞[1]。 CD40L 是 B 细胞上的一种 II 型跨膜蛋白,可触发 B 细胞分化、成熟和凋亡的重要信号[4]。 CD40L 通过与 T 细胞交联来发挥作用产生共刺激信号,从而与 TCR/CD3 连接和 CD28 共刺激一起增强 IL4 和 IL10 的产生,并促进干扰素-γ 和 TNF-α[1] 的产生[4]。 CD40L 与抗原呈递细胞 (APC) 上的 CD40 结合,通过刺激 I-κB 激酶 (IKK) 激活 TNFR 相关因子 2 和 IKK2 依赖性通路,增加 NF-κB DNA 结合和 p65 核转位。I-κB 激酶的激活导致 c-Jun N 末端激酶强烈激活以及 GST-I-κB 和 GST-p65 磷酸化[2]。 CD40L 参与 MAPK强烈抑制 Bcl-6 的途径,诱导 Erk1/2、p38 和 Jnk1/2 磷酸化,并激活 NF-κB[3] 介导的 IRF4。 CD40L 还结合并发出信号通过几个整合素,包括 αvβ3 和 α5β1,它们与 CD40L 的三聚体界面结合。CD40L 在免疫反应中发挥重要作用,是炎症的主要靶点[5]。CD40L 广泛存在于不同动物中,而小鼠中的序列与大鼠高度相似(93.85 %),但与人类和恒河猴有很大不同,相似度分别为 77.69% 和 77.31%。小鼠中的CD40L被切割成膜形式(1-260个氨基酸)和可溶性形式(112-260个氨基酸)的2条链,而人中的可溶性形式通过蛋白水解加工源自膜形式。血小板中可溶性 CD40L 的释放部分受到 GP IIb/IIIa、肌动蛋白聚合和基质金属蛋白酶 (MMP) 抑制剂敏感途径[6]的调节。

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参考文献:[1]. Blotta MH, et al. Cross-linking of the CD40 ligand on human CD4+ T lymphocytes generates a costimulatory signal that up-regulates IL-4 synthesis. J Immunol. 1996 May 1;156(9):3133-40.

[2]. Schwabe RF, et al. CD40 activates NF-kappa B and c-Jun N-terminal kinase and enhances chemokine secretion on activated human hepatic stellate cells. J Immunol. 2001 Jun 1;166(11):6812-9.

[3]. Batlle A, et al. CD40 and B-cell receptor signalling induce MAPK family members that can either induce or repress Bcl-6 expression. Mol Immunol. 2009 May;46(8-9):1727-35.

[4]. Mikolajczak SA, et al. The modulation of CD40 ligand signaling by transmembrane CD28 splice variant in human T cells. J Exp Med. 2004 Apr 5;199(7):1025-31.

[5]. Takada YK, et al. Soluble CD40L activates soluble and cell-surface integrin αvβ3, α5β1, and α4β1 by binding to the allosteric ligand-binding site (site 2). J Biol Chem. 2021 Jan-Jun;296:100399.

[6]. Pietravalle F, et al. Human native soluble CD40L is a biologically active trimer, processed inside microsomes. J Biol Chem. 1996 Mar 15;271(11):5965-7.

[7]. Rahman M, et al. Platelet-derived CD40L (CD154) mediates neutrophil upregulation of Mac-1 and recruitment in septic lung injury. Ann Surg. 2009 Nov;250(5):783-90.

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