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PART 1 CCK-8 简介
■ CCK-8 比色检测试剂盒
CCK-8 溶液可以直接加入到细胞样品中,不需要预配各种成分。WST-8 在电子耦合试剂存在的情况下,可以被线粒体内的一些脱氢酶的电子传递还原生成橙黄色的甲瓒 (Formazan)。而线粒体脱氢酶只在活细胞中存在,因此细胞增殖越多越快,则颜色越深;化合物的细胞毒性越大,细胞死亡量越多,则颜色越浅。对于同样的细胞,颜色的深浅 (生成的甲瓒量) 和细胞数目呈线性关系。可通过酶标仪检测 430-490 nm 处的吸光度 (OD 值),OD 值与细胞活力成正比,从而进行定量分析。
其中最高分文章为中国科学院上海营养与健康研究所肖意传教授团队的 Cytoplasmic DNA sensing by KU complex in aged CD4+ T cell potentiates T cell activation and aging-related autoimmune inflammation,发表在 Immunity (IF 43.474)。
其他高分期刊还包括
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Cell Mol Immunol. 2022 Sep;19(9):1030-1041. J Med Virol. 2022 Aug;94(8):3847-3856. ACS Nano. 2022 Aug 3. 10.1021/acsnano.2c06300. Immunity. 2021 Apr 13;54(4):632-647.e9.
Nat Commun. 2022 May 10;13(1):2563.
Adv Mater. 2021 Nov;33(45):e2104594.
Nat Cell Biol. 2020 Dec;22(12):1447-1459.
Signal Transduct Target Ther. 2020 Nov 6;5(1):216.
Mol Cancer. 2019 Nov 14;18(1):161.
图 4. iZAK2 对小鼠原代 CD4+ T 细胞活力的影响[1]
■ 客户验证 2---细胞活力检测
图 5. CCK-8 法测定不同复氧时间和
不同 poly (I:C) 浓度下的细胞活力[2]
■ 客户验证 3---细胞增殖测定
图 6. CCK-8 法测定 NIH 3T3 细胞
吞噬死细胞前后的细胞活力[3]
小白: CCK-8 与细胞孵育后一般多久可以检测呢? 小白: CCK-8 检测依赖于脱氢酶催化的反应,所以还原剂会干扰检测,那我该如何确定我的待测溶液是否有还原性呢? 小M: 以下方法任选其一均可终止 CCK-8 反应:a). 在显色反应后,将培养板放置 4℃ 冰箱内;b). 每孔加 10 μL 0.1 M HCl 溶液;c). 每孔加 10 μL 1% (w) 的 SDS 溶液。 小M: 此外,需要注意!若培养时间较长,一定要注意蒸发问题。可以在 96 孔板的四周每孔中加入培养基或无菌 PBS,同时将培养板置于靠近培养箱内水源的地方,缓减蒸发。
参考文献
1.
Wang Y, et al. Cytoplasmic DNA sensing by KU complex in aged CD4+ T
cell potentiates T cell activation and aging-related autoimmune
inflammation. Immunity. 2021 Apr 13;54(4):632-647.e9. 2.
Chen E, et al. Poly(I:C) preconditioning protects the heart against
myocardial ischemia/reperfusion injury through TLR3/PI3K/Akt-dependent
pathway. Signal Transduct Target Ther. 2020 Nov 6;5(1):216. 3.
Lu J, et al. Efficient engulfment of necroptotic and pyroptotic cells
by nonprofessional and professional phagocytes. Cell Discov. 2019 Aug
6;5:39.
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