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[转载]每日科研进展 l 2023.10.20 l 利用在大肠杆菌中产生dsRNA诱导RNAi沉默地中海果蝇的内源基因

已有 717 次阅读 2023-10-20 09:06 |系统分类:科研笔记|文章来源:转载

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利用在大肠杆菌中产生dsRNA诱导RNAi沉默地中海果蝇（Ceratitis capitata）的内源基因

地中海果蝇是影响全世界水果和蔬菜生产的主要害虫，其防治主要依靠杀虫剂。双链 RNA（dsRNA）能够下调内源基因，从而通过 RNA 干扰（RNAi）影响害虫和病原体的基本生命功能。然而，这一策略尚未在地中海果蝇中得到应用。

该研究中，通过向成虫注射体外转录的基因特异性 dsRNA筛选七个候选靶基因。与dsGFP的对照处理的Ceratitis capitata相比，有几个基因被明显下调，导致昆虫死亡率增加。

其中三种 dsRNA：与 ATP 合成酶 beta 亚基（ATPsynbeta）、液泡 ATP 酶（V-ATP 酶）和核糖体蛋白 S13（RPS13）同源，在注射后 48 小时内就能使存活率减半。

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图 1.利用注射dsRNA进行害虫防治

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图 2.饲喂dsRNA对雌性、雄性靶标基因表达量的影响

随后，利用大肠杆菌中生产出了这三种 dsRNA，以及dsGFP 作为对照，并将它们作为口服杀虫化合物对褐飞虱成虫进行了测试。结果观察到，与对照组相比，处理三天后，V-ATPase 和 RPS13 mRNAs 的下调幅度明显（分别约为 30% 和 90%）。Ceratitis capitata没有明显死亡，但通过沉默 V-ATPase 和 RPS13，产卵和孵化率均有所下降。