棉铃虫 GATAe 转录因子通过与其他转录因子的相互作用来调节苏云金芽孢杆菌 Cry1Ac 受体基因 ABCC2 的表达

棉铃虫是一种世界性害虫，已通过表达 Bt Cry 毒素的转基因植物得到有效控制。为了发挥毒性，Cry 毒素与幼虫中肠细胞中的不同受体结合。此前，我们报道了GATA转录因子GATAe激活不同昆虫细胞系中多个棉铃虫Cry1Ac受体的表达。在此，分析了 GATAe 调节 HaABCC2 基因表达的机制，HaABCC2 基因是 Cry1Ac 的关键受体。在棉铃虫幼虫中通过 RNAi 沉默 HaGATAe 基因证实了 HaGATAe 对中肠 HaABCC2 表达的激活作用。 使用在不同修饰的 HaABCC2 启动子的调控下表达报告基因的 Hi5 细胞，通过定点诱变分析所有潜在 GATAe 结合位点的贡献。 DNA Pull-down 分析显示，GATAe 与不同的预测 GATA 结合位点结合，并且不同 GATAe 结合位点的突变鉴定了负责启动子活性的两个结合位点。 结合位点 B9 位于转录起始位点附近，对 HaABCC2 表达有重要贡献。 此外，DNA Pull-down 分析显示，除 GATAe、HaGATAa、HaGATAb、HaGATAc 和 HaGATAd 之外，棉铃虫中 GATA TF 家族的所有其他成员也与 HaABCC2 启动子结合，并降低了 GATAe 依赖性启动子活性。

图 1. 棉铃虫 GATAe 转录因子通过与其他转录因子的相互作用来调节苏云金芽孢杆菌 Cry1Ac 受体基因 ABCC2 的表达模式图

最后，分析了中肠细胞中表达的除GATA TF之外的几种TF的HaABCC2启动子的潜在参与调节。 HaHR3 抑制 HaABCC2 启动子的 GATAe 依赖性活性，而另外两个中肠相关 TF HaCDX 和 HaSox21 也与 HaABCC2 启动子区域结合并增加 GATAe 依赖性启动子活性(图 1. )。 所有这些数据表明，GATAe 通过与启动子区域的 HaGATAe 结合位点结合来诱导 HaABCC2 表达，并且其他 TF 参与调节 HaGATAe 驱动的 HaABCC2 表达。

https://doi.org/10.1002/arch.22048