RNA 干扰遗传转化系统的建立及秦岭细粘束孢Leptographium qinlingensis FlbA基因的功能分析

秦岭细粘束孢 Leptographium qinlingensis是一种在秦岭地区流行的华山松病原真菌。然而，要从功能层面鉴定该真菌的致病基因，需要一种有效的基因干扰策略。该文章以 RNA 沉默载体 pSilent-1 为模板，通过同源重组和菌株干扰系统筛选，建立了农杆菌 GV3101 介导的 RNA 干扰遗传转化系统，该系统适合于秦岭梭菌的基因研究。

图 1. 实验菌株的抗生素敏感性

利用上述 RNA 干扰方法对 LqFlbA 基因进行了沉默，得到的转化子表现出不同程度的沉默，基因沉默效果从 41.8% 到 91.4% 不等。与野生型相比，LqFlbA-RNAi 突变体的菌落形态发生了改变，菌丝生长缓慢，对宿主 P. armandii 的致病性降低。

图 2.LqFlbA沉默对L. qinlingensis生长繁殖的影响

图 3.LqFlbA对L.qinlingensis菌致病力的影响

结果表明，该方法为研究L. qinlingensis基因功能提供了一个有用的反向遗传系统，LqFlbA在L. qinlingensis的生长、发育和致病性中起着关键作用。

https://doi.org/10.3390/ijms241613009