科罗拉多马铃薯甲虫烟碱乙酰胆碱受体亚基 Ldα3、Ldα8 和 Ldβ1 与新烟碱类化合物的相互作用

科罗拉多马铃薯甲虫（CPB）（Leptinotarsa decemlineata (Say)）是一种破坏性极强的检疫害虫。过去二十年来，新疆一直使用新烟碱类杀虫剂（尤其是噻虫嗪和吡虫啉）防治该虫，当地田间种群也因此产生了不同程度的抗药性。然而，目前人们对烟碱乙酰胆碱受体（nAChRs）对新烟碱类杀虫剂耐药性的作用研究较少。

先前的研究表明，nAChRα1、α3、α8 和 β1 是一些重要农业昆虫中新烟碱类药物的主要靶标亚基，其中包括 L. decemlineata 的 nAChRα1 亚基（Ldα1）。

在本研究中，使用实时定量 PCR 比较了噻虫胺和吡虫啉亚致死剂量处理 72 小时后 Ldα3、Ldα8 和 Ldβ1 的表达水平。

图 1.3个nAChR基因表达水平分析

然后，采用双链 RNA（dsRNA）喂养法，通过 RNA 干扰（RNAi）将这些基因分别和 Ldα1 同时敲除 6 天，以探讨它们在 CPB 对吡虫啉和噻虫嗪敏感性中的作用。

图 2.dsRNA处理后基因的相对表达量分析

结果表明，噻虫嗪和吡虫啉处理后Ldα3、Ldα8和Ldβ1的表达较对照显著降低36.99%~74.89%。RNAi引起的靶基因的显著下调显著降低了噻虫嗪和吡虫啉暴露的死亡率，分别降低了34.53%-56.44%和28.78%-43.93%。

图 3.饲喂不同dsRNA后昆虫的体重和死亡率分析

此外，成虫存活率不受每种dsRNA喂养处理的影响，而单个基因RNAi饲喂4天和6天后，受试成虫的体重明显下降。

该研究表明，噻虫嗪、吡虫啉会下调Ldα3、Ldα8和Ldβ1基因的表达，它们在CPB对新烟碱类药物耐受性中起着重要作用。

https://doi.org/10.1016/j.pestbp.2023.105558