在科罗拉多马铃薯甲虫细胞中无法触发RNA干扰的原因是由于小干扰RNA的低效摄取

目前，利用外源性小干扰RNA (siRNA)或小发夹RNA (shRNA)在昆虫体内引发RNA干扰(RNAi)的研究进展有限。相反，长双链RNA (dsRNA)被用来诱导昆虫靶基因的敲低。在这里，我们比较了si/sh RNA和dsRNA在科罗拉多马铃薯甲虫(CPB)细胞中的效力。CPB细胞对dsRNA表现出高效的RNAi应答。然而，si/sh RNA在CPB细胞中触发RNAi的效率较低。共聚焦显微镜观察Cy3标记的si/sh RNA细胞摄取，与dsRNA相比，si/sh RNA摄取减少。

图 1. CPB细胞对dsRNA,si/sh RNA的摄取

si/sh RNA在CPB细胞条件培养基中是稳定的。虽然数量很少，但当被CPB细胞内化时，si/sh RNA被Dicer酶加工（图 2）。

图 2. CPB细胞的胞外稳定性和胞内si/sh RNA加工

同时，脂质介导转染和嵌合dsRNA方法被用于改善si/sh RNA的传递（图 3）。

图 3. 提高CPB细胞中si/sh RNA诱导RNAi效率的细胞递送方法

我们的研究结果表明，CPB细胞对si/sh RNA的摄取效率低下，导致RNAi反应无效。然而，在有效的递送方法的帮助下，si/sh RNA可能是开发靶向RNAi介导的生物农药的有用选择。

https://doi.org/10.1002/arch.22036