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[转载]每日科研进展 l 2023.03.14 l 通过修饰的脂质体递送Met基因的 dsRNA 提高 RNAi 效率

已有 1505 次阅读 2023-3-14 08:57 |系统分类:科研笔记|文章来源:转载

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通过修饰的脂质体递送Met基因的 dsRNA 提高 RNAi 效率

RNAi技术在害虫防治中的应用既环保,特异性又强。然而,在不同物种中,RNAi 的效率往往不一致,找到合适的载体元件被认为是成功克服生物和非生物障碍到达目标位点的关键。

草地贪夜蛾 (FAW) 是全球最重要的农业害虫之一,最近迅速蔓延到世界其他地区。在这项研究中,报道了一种提高 dsRNA 载体复合物稳定性和 RNAi 效率的方法。

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图 1. Met3@PEI@LNPs 的制备和递送示意图 

选择烯虫酯耐受基因 (Met) 作为靶标,该基因对草地贪夜蛾的生长发育至关重要。用聚乙烯亚胺 (PEI) 修饰生物材料纳米脂质体 (LNP) 以递送 Met  dsRNA

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图 2. Met基因相关的RNAi效率分析 

合成的 Met3@PEI@LNPs 达到了 385 nm 的大小,并且被发现可以有效地加载 dsRNA。通过稳定性和保护试验,发现 LNPs 提供了可靠的保护。

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 3. FAM生命表分析

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图 4.电镜分析载体的特征

此外,释放曲线还表明,LNPs能够在昆虫中肠碱性条件下防止过早释放,但在进入靶细胞的酸性环境后加速释放。制备的LNPs细胞转染效率达到96.4%毒性试验表明,使用LNPs可以显着提高干扰效率,当LNPsdsRNA浓度仅为对照的25%时,干扰效率达到91.7%

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图 5.cy5.5的荧光光谱分析

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 6.RNAi效率以及昆虫死亡率分析

Met的成功干扰表明它可以显着缩短幼虫期,使幼虫提前化蛹,从而达到控制的目的。

在这项研究中,我们展示了使用纳米技术提供一种用于害虫控制的新型 RNAi 递送方法。为RNAi技术在鳞翅目昆虫中的应用提供了参考依据。

原文链接:

https://doi.org/10.1021/acsami.2c20151






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