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黑水虻高效转基因体系的建立
黑水虻的幼虫能够将有机废物生物转化为有价值的生物质,其可用于缓解固体废物问题,是一种解环境问题的很有应用价值的昆虫。我们最近报道了黑水蝇的高质量基因组组装;对该基因组序列的分析将进一步加深对昆虫生物学的理解,并确定可被操纵以提高生物转化效率的基因。为了能够对黑水虻进行基因操作,我们已经为这种具有重要经济意义的昆虫建立了第一个转基因方法(图 1)。
图 1. BSF 的种系转化
我们克隆并鉴定了普遍存在的肌动蛋白 5C 启动子 (Hiactin5C-p3k) 和三个内源性 U6 启动子(HiU6:1、HiU6:2 和 HiU6:3)。Hiactin5C 启动子用于驱动 piggyBac 转座酶的超活性变体的表达,与野生型转座酶相比,其转化率提高了六倍。此外,我们使用该转基因系统评估了三个 HiU6 启动子。 HiU6:1 和 HiU6:2 启动子提供了最高的 RNAi 敲低效率(图 2),因此是未来 CRISPR 开发的有前途的候选者。
图 2. BSF 中 U6 基因的鉴定和内源性 U6 启动子活性的评估
总的来说,我们的研究结果为黑水蝇的基础研究和基因操作提供了有价值的基因工程工具包。
原文链接:
https://doi.org/10.1111/1744-7917.13147
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